nf-κb信号通路在丙烯腈诱导大鼠脑损伤中的作用

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1、分类号：R11密级：研究生学位论文NF-κB信号通路在丙烯腈诱导大鼠论文题目（中文）脑损伤中的作用TheroleofNF-κBsignalingpathwayin论文题目（外文）braininjuryinducedbyacrylonitrileinrats研究生姓名张瑞萍学科、专业公共卫生与预防医学·儿少卫生与妇幼保健学研究方向生殖毒理学位级别硕士导师姓名、职称李芝兰教授论文工作2017年01月至2018年03月起止年月论文提交日期2018年03月论文答辩日期2018年05月学位授予日期2018

2、年06月校址：甘肃省兰州市NF-κB信号通路在丙烯腈诱导大鼠脑损伤中的作用摘要目的：探究ACN诱导的脑组织氧化应激和炎症反应对NF-κB信号通路的影响，以及NF-κB激活后对凋亡相关基因的调节作用，为ACN神经毒性机制深入研究提供依据。方法：60只SPF级健康成年雄性SD大鼠，随机分为5组：对照组（玉米油）、ACN低、中、高ACN组（11.5、23.0、46.0mg/kgACN）、NAC干预组（46.0mg/kgACN+300mg/kgNAC），灌胃染毒，每天1次，每周6次，连续4周。末次染毒后

3、，次日心脏采血后处死大鼠。（1）染毒前及末次染毒后，采用旷场实验（open-fieldtest，OFT）评价大鼠自主活动水平；（2）称量大鼠脑湿重，计算脏器系数；（3）制备脑组织HE病理染色切片，观察脑组织病理学改变；（4）制备脑组织匀浆，ELISA法测定大鼠脑组织内炎症细胞因子浓度；生化法检测脑组织中GSH、MDA含量以及GSH-Px、SOD、CAT酶活力；（5）Real-TimePCR检测脑组织NF-κB信号通路以及线粒体凋亡途径相关基因IKK-α、IκB、NF-κB、TLR4、caspas

4、e-9和caspase-3mRNA表达水平；（6）WesternBlot检测脑组织NF-κB信号通路以及线粒体凋亡途径相关蛋白NF-κB、IKK-α、p-IKKα/β、IκB-α、p-IκBα、TLR4、Cytc、caspase-9、caspase-3、Bax、Bcl-2相对表达量。（7）TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡水平。结果：（1）ACN染毒后，在OFT0-10min和11-20min运动过程中，高ACN组大鼠lardist值、总距离与对照组比较均增加（P<0.05）。与高ACN组比较，

5、NAC组大鼠在OFT0-10min和11-20min运动过程中总距离减少（P<0.05）。（2）染毒前及整个染毒过程中，各剂量组大鼠体重变化差异无统计学意义（P>0.05）。染毒结束后，各剂量组大鼠脑脏器系数均未发生明显变化（P>0.05）。（3）HE染色可见，中、高ACN组大鼠脑组织损伤明显，皮层区锥体细胞结构不完整，胞核淡染，部分细胞轴突、尼氏体消失，并观察到神经细胞卫星现象；海马CA1区神经元排列紊乱，层次不清，胞核淡染、胞浆模糊，细胞结构不清晰。与高IACN组比较，NAC组大鼠脑组织皮层

6、区锥体细胞结构较完整，可见胞核、轴突，尼氏体较丰富；海马CA1区神经元排列较整齐，结构较清晰。（4）与对照组相比，低、中、高ACN组大鼠脑组织MDA含量均升高（P<0.05）；中、高ACN组大鼠脑组织GSH含量降低（P<0.05）；高ACN组GSH-Px活力下降（P<0.05）；低ACN组CAT活力下降（P<0.05）。与高ACN组相比，NAC组大鼠脑组织SOD活力升高，MDA含量、CAT活力降低。（5）与对照组比较，低、中、高ACN组大鼠脑组织TNF-α浓度均升高（P<0.05）；中、高ACN

7、组IL-1β浓度均升高；高ACN组IL-6浓度升高（P<0.05）。与高ACN组比较，NAC组大鼠脑组织中炎症细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平均降低（P＜0.05）。（6）与对照组相比，中、高ACN组IKK-α、NF-κBmRNA表达均上调（P<0.05）；高ACN组大鼠脑组织TLR4、Caspase-9、Caspase-3mRNA表达均上调（P<0.05）。与高ACN组相比，NAC组IKK-α、NF-κB、Caspase-9、Caspase-3mRNA表达均下调（P<0.05）。（

8、7）与对照组相比，低、中、高ACN组p-IKKα/β、IKK-α、NF-κB、Cytc、Caspase-9蛋白相对表达量均升高（P<0.05）；中、高ACN组p-IκBα、Bax蛋白相对表达量均升高（P<0.05）；高ACN组TLR4蛋白相对表达量升高（P<0.05）；高ACN组Bcl-2蛋白相对表达量降低（P<0.05）。与高ACN组比较，NAC组大鼠脑组织p-IKKα/β、NF-κB、Cytc、Caspase-9、Caspase-3蛋白相对表达量均升高（P<0.05）；Bcl-2蛋白相对表达