两种不同的上游法处理精液对常规体外受精结果的影响

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1、两种不同的上游法处理精液对常规体外受精结果的影响　　[摘要]目的：探讨使用两种不同的上游法分离的精子对常规体外受精（in-vitrofertilization，IVF）结果的影响。方法：本研究共287个周期，将患者夫妇，女方卵子分为约等的两份，男方精液分为等量的两份，并分别使用两种上游法优选精子，并将分离的精子与相应卵子行常规体外受精操作。观察两组受精卵的受精情况，并将受精卵的受精率、卵裂率、优质胚胎率作分析比较。结果：先离心组完全受精失败14个周期，受精率为72.4%，卵裂率为91.2%，优质胚胎率为52.5

2、%；先上游组完全受精失败12个周期，受精率为75.1%，卵裂率为93.2%，优质胚胎率为53.9%，各对照指标未发现差异有统计学意义（P＞0.05）。结论：此两种上游方法对于受精结果的影响虽无统计学意义，但结合相关文献报道，先上游法应优于先离心法。　　[关键词]常规体外受精；上游法；受精失败　　[中图分类号]R715.2[文献标识码]B[]1673-7210（2010）11（c）-046-02　　　　Theresultsoffertilizationsming-upmethods　　ZHANGHong1,MAB

3、o2　　(1.DepartmentofPostgraduate,GuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China;2.ReproductiveCenterofPoliceHospital,Shenzhen518029,China)　　[Abstract]Objective:Toparetheresultsofin-vitrofertilization-upmethodstoseparatespermandco-cultureentinourcenterfromFebrua

4、ry2009toSeptember2009,spermcollectedfrompatients-upfirstmethod,anotherethod.Then,co-culturingthetreatedspermatchedoocytes.Thedifferencesoffertilizationresultsbetbryorate-upfirstgroup,12cyclesbryorate-upfirstgroup,-upmethods,didnoteffectthein-vitrofertilizati

5、onresultssignificantly.　　[Key-up;Fertilizationfailure　　　　上游法是较早用于分离精子的技术之一，由于其操作简便也是现在多数生殖实验室使用的精子优选方法[1]。上游法的原理就是活力高的精子可以从离心后的精液沉淀中游出至上层的培养液中[2]。随着辅助生殖技术的不断发展，优选精子的上游法也有了其衍生方法。本研究主要比较两种改良上游法对IVF的受精结果的影响。第一种上游法为：将精子洗涤液（美国Quinn's）与精液1∶1充分混匀，若精液不液化，则反复吹吸使之液化，然

6、后置于15ml离心管中，用700g离心力，离心5min，离心后去上层液体，将精液沉淀吸出后缓慢置于装有0.5ml卵裂液HTF（美国Quinn's）的5ml试管底部，然后放置于5%二氧化碳，37℃温箱中培养15～25min后将上悬浊液吸出放于另一无菌的5ml小试管，待用。此种上游法简称先离心法，其优点是：操作简单，节省试验耗材，能最大程度地回收精子。缺点是：离心后高密度的有缺陷的精子及白细胞会产生高浓度的活性氧，进而使正常精子受到损害[3]，而且在吸取上悬浊液时容易混入死精子及其他杂质。第二种上游法：取3～4支1

7、0ml圆底试管，每支试管加入1.5ml精子洗涤液，将精子洗涤液与精液1∶1混匀并反复吹吸，然后将精液分为2～3等份，分别缓慢地加入圆底试管底部，然后将含精液试管倾斜45°，置于5%二氧化碳，37℃温箱中培养30～45min，培养后将各管上悬浊液吸入15ml离心管中，以700g离心力离心5min，离心后弃去上清液，以0.3～0.4ml卵裂液HTF与沉淀混匀，待用。此种上游法简称先上游法，优点是：减少了异常精子及精浆中的其他杂质对正常精子的损伤；缺点是：操作较复杂，对精子密度要求高。此两种方法均较传统的上游

8、法[4]减少了离心次数，而离心可能对精子产生损伤[5]论文下载。　　1资料与方法　　1.1一般资料　　对2009年2～9月因输卵管因素不孕在广东公安边防总队医院生殖中心接受辅助生殖治疗的患者进行相关研究分析，为排除干扰因素我们选取夫妇双方年龄均＜40岁，符合体外受精（in-vitrofertilization，IVF）指征，获卵个数不少于6个，男方精液量不少于2ml，共287周期进入此