胶体金、rpr两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析

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1、胶体金、RPR两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析黄彩英本钢总医院检验科,辽宁本溪117000[摘要]目的为了比较胶体金(CollodalGoldTPCG)与快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)法筛查梅毒抗体区别与联系,以便对这两种方法有更明确的认识,合理选择检测方法,减少误诊与漏诊。方法2013年该院门诊和住院患者中需要检测梅毒抗体的标本,先用TPPA法检测,TPPA法检测出的阳性标本322例,再同时进行TPCG法和用RPR滴度检测。结果322例TPPA法阳性标本中TPCG法320例,阴性2例;RPR阳性114例,阴性208例。在TPPA阳性的标本中TPCG和RPR阳性率有显著性差异,TP

2、CG阳性率高于RPR。结论TPCG法比较RPR更适合医院筛查,尤其是基层医院。.jyqkin观察结果,两条紫红色线者为阳性,仅有对照线一条线者为阴性。RPR法进行原倍-1:32的滴度检测,滴度大于等于原倍者凝集者记作阳性,各滴度均不凝集者记作阴性。1.5统计方法应用SPSS17.0软件进行数据统计与分析,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。2结果(1)结果结果见表1。322例TPPA法阳性标本320例,阴性2例(稀释后复检仍阴性,无前带现象),与TPHA符合度99.38%,;RPR阳性114例,阴性208例,与TPPA符合度35.40%。TPCG法和RPR法结果差异有

3、统计学意义(χ2=206,P<0.005),其中2例RPR出现了前带现象,分别在1:2和1:4时阳性。4讨论梅毒血清学检测根据不同抗原类型可分为非特异类脂质抗原试验和特异性螺旋体试验两大类。RPR法所用的抗原为心磷脂,卵磷脂和胆固醇的混合物,主要用于检测血清中的反应素;TPCG法是应用现代生物工程技术制备的高度纯化的单克隆梅毒螺旋体的基因工程抗原,高度选择地找寻与之相结合的抗体的原理,是一种将TPAb标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术,当金标蛋白在相应的配体处大量聚集时,在反应区肉眼可见红色或粉红线,检测的是血清中特异性抗体。322例TP

4、PA法阳性标本,用TPCG法复查阳性320例,2例阴性,阳性符合度99.38%,以TPPA法为金标准,TPCG法漏检率为0.343%(2/322),与TPPA相比阳性符合度>95%,这与一些结论不同[1-3]。RPR滴度阳性114例,与TPPA相比阳性符合度35.40%。TPCG法和RPR法相比检测结果存在显著性差异。TPCG法与TPPA的符合率高于RPR法。这主要是TPPA法和TPCG法均检测的是特异性抗体,为同一种抗体,TPPA法明胶颗粒上包被的是梅毒螺旋体总抗原,检测的梅毒螺旋体的总抗体;TPCG法试纸上包被的是梅毒螺旋体的基因片段,检测的是梅毒螺旋体抗体的部分点位;而RPR检测

5、的是梅毒螺旋体的非特异性抗体。TPCG法检测在322例TPPA阳性标本中未出现抗体过多的前带现象,RPR出现2例前带现象,分别在1:2和1:4时出现阳性。若使用两者筛查,RPR法会因为抗体过剩而发生假阴性,在使用TPCG检测中未发现此现象,也未发现此方面的报道,这一点胶体金法优于RPR法。TPCG法和RPR在检测梅毒抗体时,根据报道均存在假阳性。关于RPR法假阳性的报道很多[4-5],马红霞报道RPR阳性预测值为63.2%[4]。RPR试验作为血清梅毒抗体检测的一种筛选试验,它是检测患者体内血清中的反应素(抗脂质抗体)。而反应素亦可在非密螺旋体患者血清中出现,例如风疹、水痘等病毒性感染,类风

6、湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫病,麻风、疟疾,以及吸毒者,妊娠、甚至个别健康人也可呈生物学假阳性,对此已经成为医学界的共识。对TPCG法假阳性报道也较多[6-8],由于TPCG法反应步骤简单,不能有效地将与其结合的杂抗体分离,具有较高的假阳性率。两种方法阳性时均需要用TPPATPHA等确证。TPCG法和RPR法均具有快捷、简便、结果易于判断的特点,均用于筛查试验,筛查方法还有酶联和发光法。RPR是传统的筛查方法,是世界卫生组织推荐的筛查方法。由于梅毒螺旋体感染后心磷脂抗体的出现晚于特异性抗螺旋体抗体,而且梅毒晚期又可能转阴,与TPPA比RPR灵敏度低,不适于一期梅毒早期、三期梅毒诊断

7、,对潜伏期和神经梅毒也不敏感[9-11],在一期和三期中存在假阴性。近年来一些中国学者陆续提出用特异性抗体方法筛查,确证后再检测RPR确定疗效[12]。TPCG法近几年发展迅速,常用于侵入性检查和急诊术前,也有用于献血人员传染病筛查[13]。输血及手术前进行血液筛查时,医院应尽可能选用敏感性高的试剂,以避免因漏检给医院在法律上带来不必要的麻烦。因此,在梅毒项目上,应使用敏感性高且能发现既往感染的梅毒螺旋体抗原

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