无偿献血者梅毒抗体筛查方法的比较.doc

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1、无偿献血者梅毒抗体筛查方法的比较作者：杨政宇,杨金桂,许玉琼【关键词】梅毒；酶联免疫吸附测定；凝集试验；快速血浆反应素试验　　梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病，近年来梅毒的发病率有逐年上升的趋势。根据卫生部每年发布的《27种法定报告传染病发病及死亡率》报告，梅毒的发病率由2003年的4.5/10万迅速增长到2006年的12.8/10万，对我国输血安全造成了越来越大的影响。目前，梅毒血液检测的方法主要有：快速血浆反应素试验（RPR）、甲苯胺红快速反应素试验（TRUST）、酶联免疫试验（ELISA

2、）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体微粒凝集试验（TPPA）、聚合酶链式反应试验（PCR）以及免疫层析法（GICA）等［1］。国家明确规定献血员血液梅毒试验必须为阴性，因此，在献血员筛查中，选择灵敏度高、特异性好的梅毒检测方法，对于防止梅毒经过血液传染，保证临床用血安全上有着非常重要的意义。在血站，常用RPR法、ELISA法和TPPA法进行献血员梅毒抗体检测。因此，对这3种方法进行了比较，现报告如下。　　1材料与方法　　1.1标本　　本血站2004年1月～2006年12月无偿献血者1778

3、1例。　　1.2试剂RPR法　　试剂由上海荣盛公司提供，TP-ELISA双抗原夹心法试剂由北京华大吉比爱生物技术有限公司提供，TPPA确证试剂由北京华大吉比爱物技术有限公司提供。　　1.3仪器　　UranusAE100-1-4全自动酶免分析仪（深圳市爱康电子有限公司）、MK3酶标仪（芬兰雷勃）、TECAN型洗板机（天津国际贸易有限公司）。　　1.4方法　　用RPR法和ELISA法同时对无偿献血者进行梅毒血清学检测，阳性样本进行复检，复检阳性样本用TPPA方法进行确认。所有试验均严格按照相应的试剂盒说

4、明书进行操作和判定结果。统计学分析应用SPSS12.0软件。　　2结果　　2.1RPR和ELISA结果见表1。共检测标本17781例，RPR法阳性172例,阳性率为0.98%;ELISA法阳性204例，阳性率为1.14%，2种检测方法比较差异具有统计学意义（P<0.05）。表13无偿献血者梅毒抗体的RPR和ELISA检测比较（略）　　2.2TPPA复检对RPR阳性和（或）ELISA阳性共209份标本及室内质控定值血清1份进行TPPA复检。结果见表2。应用卡方检验比较RPR、ELIST和TPPA

5、3种方法的检测结果，RPR和ELISA法相比较P﹤0.01，表明两种方法差异有显著性；ELISA和TPPA法相比较P﹥0.05，表明两种方法差异无显著性。表2无偿献血者梅毒抗体筛查TPPA确认检测结果（略）注:RPR与ELISA检测结果比较:χ2=16.11,P＜0.01;TPPA与ELISA检测结果比较,χ2=0.02,P＞0.05　　3讨论　　梅毒筛查方法非常多，常用的初筛方法有RPR、TRUST以及ELISA3种。从原理上说，RPR、TRUST是利用牛心磷脂检测非特异性的心磷脂抗体，而ELIS

6、A是利用基因重组抗原检测特异性的TP（苍白密螺旋体）抗体，TPPA是将裂解的梅毒螺旋体包被于明胶颗粒检测血清中的特异性TP抗体［2］。　　RPR作为非特异性的检测方法，具有操作简便，检测速度快的特点，但是由于非特异性检测的缺陷，容易出现假阳性，而且在梅毒潜伏期、3期梅毒期均容易出现漏检，灵敏度和特异性存在着较大的局限，且手工操作及肉眼判断，受主观因素影响很大。　　ELISA方法随着基因重组抗原发展，利用双抗原夹心法既可以检测特异性IgG，又可以检测特异性IgM，相比上世纪90年代产品在灵敏度和特异性

7、上均得到了很大的提高，而且ELISA实验过程可以依靠于仪器进行自动化操作及判读，可减少手工操作的影响，而且利于结果的保存［3］。但对于梅毒患者及治愈者，特异性的TP抗体会持续出现，甚至携带终生，ELISA阳性只能说明正在感染或者已经感染过，不能判断梅毒活动与否，作为临床梅毒诊断，不能作为疗效的检测方法［1］。　　本实验中，RPR阳性且ELISA阳性的样本用TPPA确认均为阳性，RPR阳性但ELISA阴性的5份样本中，TPPA确认阳性的为1份，阴性4份；ELISA阳性但RPR阴性的37样本中，TPPA

8、确认阳性的为30份，阴性7份，说明RPR的假阳性及假阴性情况均比ELISA高，作为无偿献血员的梅毒抗体筛查，RPR已经不太适用。　　　　TPPA方法是目前公认的较好的梅毒抗体的确认方法，具有很高的灵敏度和特异性，但是试剂成本高，手工操作繁琐，而且需要依靠肉眼判断，受主观影响大，结果不利于保存和查阅［4］。　　　　对于血站进行无偿献血员的筛查，ELISA方法已经非常普遍，而且随着ELISA的自动化程度的提高，已完全可以满足无偿献血员梅毒抗体筛查的需要。因此，ELISA方