散发性大肠腺癌易感性与谷胱甘肽转硫酶p1基因型的

《散发性大肠腺癌易感性与谷胱甘肽转硫酶p1基因型的》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、散发性大肠腺癌易感性与谷胱甘肽转硫酶P1基因型的【摘要】　　目的探讨中国汉族人群散发性大肠癌(SCRAC)易感性与谷胱甘肽转硫酶(GST)P1基因型的关系。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)检测108例大肠癌患者和120例健康人群的GSTP1基因型，采用χ2检验，分析比较GSTP1基因型频率在SCRAC组和健康对照组之间的分布差异。结果GSTP1基因VaL/VaL基因型频率在SCRAC组中明显增高，与对照组相比，有显著性差异(43.5%vs30.8%,P=0.002,OR=0.430,95%CI:0.250～0.739)；根据临床特征对SCRAC组进行

2、分层分析，发现VaL/VaL基因型与SCRAC病变部位无关(P>0.05)，但在DukesC期和低分化SCRAC患者中分布频率均明显增高(P<0.05)。结论GSTP1基因型与中国汉族人群SCRAC的易感性相关。【关键词】谷胱甘肽转硫酶P1基因型散发性大肠癌易感性　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbeta(SCRAC)inChineseHans.MethodsPolymerasechainreaction(PCR)aofDukesCclassification(χ2=7.380

3、,P=0.007,OR=0.347,95%CI:0.160～0.753)andpoordifferentiation(χ2=11.213,P=0.001,OR=0.270,95%CI:0.124～0.590),respectively.ConclusionsTheGSTP1genotypeisstronglycorrelatedainChineseHans.　　【KeyaSusceptibility　　　　谷胱甘肽转硫酶(glutathioneS-transferase,GST)在人体中广泛存在，尤其在生殖腺、肝脏及结肠中较高表达,属体内重要的Ⅱ相代谢

4、酶。GST能催化Ⅰ相代谢过程所产生的多种致癌物质与谷胱甘肽(GSH)巯基(-SH)共轭结合，形成亲水性物质排出体外，从而影响机体对毒性物质的解毒作用。GSTP1属GST家族重要成员，该基因第303位点碱基发生A→G突变后，其105密码子异亮氨酸被缬氨酸取代，可引起GSTP1酶活性下降，机体对多种毒性物质降解能力下降，导致肺癌、膀胱癌等多种肿瘤危险性增加［１，２］。散发性大肠癌(SCRAC)发病机制主要涉及环境和遗传两方面，而环境因素致癌在很大程度上取决于个体发生肿瘤的易感性。毒物代谢酶的基因多态现象是肿瘤遗传易感性的重要方面。本研究通过检测比较GSTP

5、1基因型频率在中国浙江汉族正常人群及SCRAC患者之间的分布差异，旨在阐明GSTP1基因型与SCRAC遗传易感的相关性。　　1临床资料　　1.1一般资料　　选择2002年4月至2006年11月本院108例经病理组织学确诊的SCRAC患者,其中男74例，女34例；平均年龄（49.1±4.3）岁；癌肿位于近端结肠者(盲肠、升结肠及横结肠)43例，远端结肠者（降结肠、乙状结肠及直肠)65例；Dukes分期：A期24例、B期45例、C期39例；肿瘤组织分化程度：高分化28例、中分化39例、低分化41例。对照组共120例，系同期门诊健康体检者，其中男78例，女4

6、2例，年龄20～65岁，平均年龄(48.8±6.7)岁。全部研究对象均为无血缘关系的浙江汉族人，SCRAC患者采血前均未行放、化疗。　　1.2方法　　(1)提取DNA：取外周静脉血5ml，EDTA抗凝，蛋白酶K消化，酚/氯仿法抽提DNA。(2)GSTP1基因型检测：采用PCR技术扩增GSTP1目的基因。引物由上海生物工程有限公司合成，引物1:5’GTAGTTTGCACAAGGTCAAG3’；引物2：5’ACAAACCTGAGGGGTAAG3’。PCR反应总体系25μl中含10×PCR缓冲液5μl；2.5μlMgCl2（2.5mmol/L），dNTPs（

7、200μmol/L）1.5μl，引物（100pmol/L）各1μl，DNA聚合酶2.5U，模板DNA40ng，其余用灭菌双蒸水补足。反应条件，97℃预变性5min，95℃变性45s，65℃退火45s，72℃延伸60s，共35个循环，最后72℃再延伸7min。PCR反应产物用BsmAⅠ限制性内切酶消化，酶切产物用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳及1.8‰硝酸银染色检测。GSTP1基因型判断：若酶切产物含329bp、113bp2个片段，则为ILe/ILe基因型(野生型)；若酶切产物含329bp、216bp、113bp3个片段，则为ILe/VaL基因型(杂合突变型);

8、若酶切产物含216bp、113bp2个片段，则为VaL/VaL基因型(纯合子突变型)。　　1.