羟基喜树碱对人胆管癌qbc939裸鼠移植瘤ps2

《羟基喜树碱对人胆管癌qbc939裸鼠移植瘤ps2》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤PS2【摘要】目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶2(COX2)的影响，分析PS2、COX2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型，将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组和羟基喜树碱高剂量组，观察移植瘤体生长情况，RTPCR法检测瘤体内PS2、COX2mRNA表达。结果与对照组比，羟基喜树碱低、高剂量组都可使移植瘤体的PS2mRNA表达增高；COX2mRNA表达降低，

2、且瘤体生长减慢，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论羟基喜树碱可降低移植瘤COX2mRNA表达，增高移植瘤体的PS2mRNA表达，并使人胆管癌裸鼠移植瘤生长减慢。【关键词】胆管癌裸鼠移植QBC939细胞PS2；COX2　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofhydroxycamptothecineonPS2andCOX2innudemicebyhumanbileductcarcinomaQBC939cellsinordertoanalyz

3、ethecorrelationbetentofthetumor.MethodsAfterthemodelofthetransplantedtumorofsubcutaneoustissueslocatedthenudemiceanbileductcarcinomaQBC939cells,30nudemicelydividedinto3groups,namely,controlgroup,hydroxycamptothecineloormunohistochemicalstainingbinedageanalys

4、isinetheexpressionofPS2andCOX2inthetumortissues.ResultsparedortissuesptothecineloorptothecineloptothecinecanreducethecontentsofCOX2andincreasethecontentsofPS2inthetransplantedtumortissues,thusinhibitingthetumorgroa;nudemouse;transplantation;QBC939cell;PS2;

5、COX2　　肿瘤的增殖、侵袭和转移是一个多阶段、多步骤的复杂过程，本实验通过观察羟基喜树碱对人胆管癌细胞株裸鼠皮下移植瘤乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶2(COX2)和瘤体生长的影响,为临床肿瘤的药物治疗提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1动物BALB/c(nu/nu)裸鼠(购自上海市肿瘤研究所中科院上海实验动物中心)，共26只，雄性，4-6周龄，体重(18±2)g，在无特殊病原体(specificpathogenfree,SPF)条件下饲养。　　1.2药物及试剂羟基喜树碱(hydroxycampto

6、thecine,HCPT，湖北黄石飞云制药公司，批号：H4202283)；PS2、COX2抗体(美国SantaCruz公司)，RTPCR相关试剂(晶美有限公司)，Trizol试剂(美国GIBCOBRL公司)。　　1.3胆管癌QBC939细胞株的培养、制备胆管癌QBC939细胞株用DMEM+100mL/L小牛血清培养至第三代生长密集时，用2.5g/L胰蛋白酶+2g/LEDTA消化、洗涤、离心后，配制成接种细胞浓度5×106/mL。　　1.4荷瘤裸鼠动物模型的建立[1]选用1.3中制备的人胆管癌QBC939细胞

7、株直接注射接种于2只裸鼠颈侧和大腿皮下，共4处，每处0.2mL，成瘤后取出肿瘤组织，取样器切成约1mm×1mm×1mm组织块，用6号套管针在左侧腋部皮下移植实体瘤模型。待瘤体直径约0.3-0.5cm时，分别标记，并随机分成3组，每组10只，共30只裸鼠。　　1.5实验分组对照组：腹腔内注射生理盐水10mL/kg；羟基喜树碱低剂量组：腹腔内注射羟基喜树碱2.5mg/kg；羟基喜树碱高剂量组：腹腔内注射羟基喜树碱10mg/kg，各组均每周腹腔注射1次，连续3周(药物剂量参照人体体重剂量的10倍左右给予)，实验共3周

8、。每周观察瘤体的生长情况，并测量瘤体的长径和短径，实验期间按以下公式计算瘤体体积(V/mm3)：V=(a×b2)×π/6[1]。　　1.6RTPCR检测PS2、COX2mRNA表达取10μg瘤体组织采用Trizol试剂提取各组标本的总RNA，以THERMOSCRIPTTMRTPCR系统(GIBCOBRL)进行逆转录和PCR反应。取1μL逆转录产物进行PCR扩增，PS2正义引物序列