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1、高糖诱导人脐静脉内皮细胞内皮微粒释放并促进细胞凋【摘要】 目的探讨高糖对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)内皮微粒释放和细胞凋亡的影响。方法用不同浓度的葡萄糖(5.5mmol/L、16.7mmol/L和33.3mmol/L)分别作用于培养成功的HUVEC0、12、24、48、72h，设立正常糖浓度组(5.5mmol/L葡萄糖)和高渗对照组(27.8mmol/L甘露醇)作为对照。应用MTT比色法检测细胞的生存率；采用流式细胞仪分别检测HUVEC内皮微粒的释放
2、水平以及细胞凋亡率。结果①MTT检测发现，33.3mmol/L葡萄糖培养12h时HUVEC的细胞数比为93%，24h时为78%，48h时为51%，72h时为40%；与0h组相比，12h组细胞数比下降但无统计学意义(P>0.05)；与12h相比，24h组、48h组和72h组细胞数比显著下降，且呈时间依赖性减低(P均<0.05)。②设5.5mmol/L正常糖浓度组培养48h时的HUVEC细胞数比为100%，则高渗对照组HUVEC细胞数比为98%，与正常糖浓度对照组比较无统计学差异(P>0.05)；16.7m
3、mol/L葡萄糖组和33.3mmol/L葡萄糖组的细胞数比分别为79%和51%，均明显低于正常糖浓度组(P均<0.05)，且前两组相比亦存在统计学差异(P<0.05)。③33.3mmol/L葡萄糖组作用12h时的HUVEC内皮微粒生成量较正常糖浓度对照组明显增加(P<0.05)，24、48、72h时增加更为显著，且呈现时间依赖性(P<0.01)；与正常糖浓度对照组相比，高渗对照组12、24、48、72h时其内皮微粒释放水平无统计学差异(P>0.05)；④高糖诱导的内皮微粒释放水平与细胞凋亡率
4、呈正相关(r=0.659,P<0.05)。结论高糖刺激诱导人脐静脉内皮细胞内皮微粒释放，促进细胞凋亡。【关键词】葡萄糖；糖尿病；动脉粥样硬化；内皮微粒；内皮功能 ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectsofhighglucoseonreleaseofendothelialmicroparticles(EMPs)andcellapoptosisinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs).MethodsHUVECsmol/L,16.7mm
5、ol/Land33.3mmol/L,respectively).Thecellsculturedinthemediacontainingglucose5.5mmol/Landmannitol27.8mmol/Lservedascontrolgroups.ThesurvivalrateofcellsinedbyMTTassay.ThelevelofEMPsreleaseandpercentageofcellapoptosisetry.Results①AccordingtoMTTdetection,thesurvivalra
6、teofHUVECsmol/L,78%for24h,51%for48h,and40%for72h.parededependentmanner(P<0.05).②Ifthesurvivalratemol/Lglucosefor48h,thenitannitol27.8mmol/Lmol/Lglucoseand51%in33.3mmol/Lglucose,obviouslylomol/Lglucose,andthetmol/Lglucosefor12,24,48and72hrespectively,inthetime
7、dependentmanner.paredalglucosegroup,thelevelofEMPsreleasedidnotsignificantlydifferinmannitol27.8mmol/Lfor12,24,48and72h,respectively(P>0.05).④Thereiccroparticlesandpromotescellapoptosis. KEYicroparticle;endothelialfunction 完整的单层内皮细胞屏障在维持血管的正常结构、功能及抗粥样硬化中起着关
8、键作用。血管内皮功能障碍是糖尿病血管病变发生的主要因素之一[1]。但是，高血糖导致血管内皮功能异常、促进动脉粥样硬化(AS)进展的确切机制仍不明确。内皮微粒(endothelialmicroparticles,EMPs)是内皮细胞活化或凋亡时从其表面释放的亚微米级颗粒，其作为反映内皮细胞功能的新标记物,在炎症反应、A
