hplc法测定羧甲司坦无糖口服溶液中羧甲司坦的含

《hplc法测定羧甲司坦无糖口服溶液中羧甲司坦的含》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、HPLC法测定羧甲司坦无糖口服溶液中羧甲司坦的含【摘要】目的建立羧甲司坦的含量测定及有关物质检测的方法。方法采用HPLC法，以C18柱（4.6mm×150mm，5μm）为色谱柱，以0.68%磷酸二氢钾和0.05%己烷磺酸钠（pH2.5）为流动相，检测波长为215nm。结果羧甲司坦在0.44～1.3mg·mL-1范围内，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系（r=0.9999），平均回收率为99.5%，RSD为1.1%（n=9），最低检测限为8.27ng，各杂质峰与主峰达到基线分离。结论本法简便、专属性及重现性好，可用于羧甲司坦含量及有关物质的测

2、定。【关键词】羧甲司坦反相高效液相色谱法有关物质羧甲司坦为半胱氨酸的巯基取代衍生物，2005年版中国药典收裁了该品种（含糖型），采用茚三酮显色比色法测定其含量［1］，也有文献报道采用HPLC蒸发光散射检测法［2］和柱前衍生荧光检测法［3］与反离子对色谱法［4］测定其含量和有关物质。本文采用反相离子对液相色谱法测定羧甲司坦的含量和有关物质，试验结果表明，该方法简便、专属性强、准确度高和重现性好。　　1仪器与试药　　美国Agilent1100高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD），ChemStationSystem工作站。　　　　羧甲司坦

3、对照品（中国药品生物制品检定所），羧甲司坦口服溶液（无糖型，批号：051101、051102、051103，规格：0.2g/10mL，由广州白云山制药总厂提供），己烷磺酸钠（分析纯，由PureChemicalAnalysisCo.,Ltd.提供），其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1含量测定　　2.1.1溶液的制备对照品溶液的制备:精密称取羧甲司坦对照品50mg，置50mL量瓶中，加0.1mol·L-1NaOH溶液5mL，使溶解，并加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。　　　　供试品溶液的制备：精密量取本品适量，加水稀释制成每1

4、mL中约含羧甲司坦1mg的溶液。　　　　空白辅料溶液的制备：取辅料适量，按照处方配比，制成不含主药羧甲司坦的空白溶液。　　2.1.2色谱条件和系统适用性试验色谱柱：DiamonsilC18（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：0.68%磷酸二氢钾和0.05%己烷磺酸钠，用磷酸调pH值2.5；检测波长：215nm；进样量：10μL。理论塔板数按羧甲司坦计算为5000，羧甲司坦峰与相邻峰的分离度符合规定，阴性对照无干扰。色谱图见图1。　　A.羧甲司坦对照品;B.羧甲司坦无糖口服溶液供试品;C.阴性对照品1．羧甲司坦　　图1羧甲司坦无糖口

5、服溶液的HPLC谱图（略）　　Figure1HPLCofchromatogram　　2.1.3线性试验精密称取羧甲司坦对照品适量，置100mL容量瓶中，加0.1mol·L-1NaOH溶液5mL，使溶解，加水稀释制成每1mL中约含羧甲司坦2.2mg的贮备液，分别精密量取适量，配制成系列浓度，按上述色谱条件测定，以羧甲司坦的质量浓度（ρ）对其相应的峰面积（A）作回归方程，结果在0.44～1.3mg·mL-1浓度范围呈良好的线性关系：A=1966.1ρ+16.771,r=0.9999（n=6）。　　2.1.4精密度试验取同一份对照品溶液，连续进

6、样6次，结果峰面积和保留时间的RSD分别为0.14%和0.45%,表明试验精密度良好。　　2.1.5重复性试验精密量取羧甲司坦口服溶液适量，平行6份，分别测定含量，结果其RSD为0.60%。　　2.1.6稳定性试验制备供试品溶液，分别在0、2、4、6h进样，6h内测定结果的RSD为0.35%。　　2.1.7空白加样回收率试验按处方比例制备空白对照液，分别加入3种比例的羧甲司坦对照液，按“2.1.2”项色谱条件进样测定回收率，结果平均回收率为99.5％，RSD为1.1%，见表1。　　2.1.8样品的测定取供试品（批号051101、05110

7、2、051103）按“2.1.1”项方法制备供试液，并按“2.1.2”项色谱条件进样测定，3批供试品的平均含量分别为101.1%、101.9%、101.4%。　　2.2有关物质测定　　2.2.1测定法量取本品适量，加水稀释制成每1mL中含羧甲司坦2mg的溶液作为供试品溶液；精密量取1mL，置100mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；按“2.1.2”项下的色谱条件，取对照溶液10μL，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的30%；精密量取供试品溶液与对照溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主

8、成分峰保留时间的3倍。　　表1羧甲司坦加样回收率试验结果（略）　　Table1Resultsofrecoverytest　　2.2.2专属性对照品溶液：精密称取羧甲司坦对照品50mg，置50m