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1、硫化氢对甲醛炎性痛大鼠行为学的影响：米琰杨海扣于水季永曾因明【摘要】目的观察鞘内注射硫化氢供体硫氢化钠(NaHS)和腹腔注射胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)对甲醛炎性痛大鼠的行为学影响，探讨小分子气体硫化氢(H2S)在炎性痛中的作用。方法成年雄性SD大鼠40只，随机分为5组(n=8)：疼痛模型组、人工脑脊液组、NaHS组、生理盐水组、PAG组。注射溶媒、NaHS或PAG后，向大鼠一侧足底皮下注射5%甲醛溶液，观察60min，进行疼痛行为学评分。结果疼痛模型组、人工脑脊液组和生理盐水组的疼痛行为学评分差异无显著性(P&g
2、t;0.05);在第二相反应时段，与疼痛模型组相比，人工脑脊液组和生理盐水组的疼痛行为学评分无统计学差异(P>0.05)，NaHS组和PAG组的疼痛行为学评分明显降低(P<0.05)。结论鞘内注射NaHS和腹腔注射PAG均能对甲醛炎性痛大鼠产生镇痛作用。【关键词】硫化氢;硫氢化钠;DL-炔丙基甘氨酸;疼痛;甲醛试验 Abstract:ObjectivesToevaluatetheeffectofintrathecalpretreatmentofsodiumhydrosulfide(NaHS)-hydrogensulfided
3、onorandintraperitonealinjectionofcystathionine-γ-liaseinhibitorPAGontheethologyofratalin-inducedinflammatorypain,andtoexploretheroleofhydrogensulfide,asmall-moleculegasininflammatorypain.MethodsThereodelgroup,ACSFgroupandthesolventgroup(P>0.05).Inthesecondphaseofrespon
4、se,therealsalinegroup,asparedtothepainmodelgroup(P>0.05),alintest H2S作为继NO、CO后的第3种内源性气体信号分子，是近20年来才开始对其生理、病理方面的研究和认识。长久以来，对于H2S的研究主要集中于它的毒性作用，如中枢神经系统和呼吸系统的影响。H2S具有与NO、CO类似的特性：小分子量气体，不通过受体发挥作用，可以自由通过细胞膜，其生成受内源性关键酶的调节，生理浓度时有很明确的特殊功能等。H2S可内源性产生，可存在于生物体内的多个系统中，并通过多种调节方式和信
5、号转导形式发挥生理病理作用。近年来有研究表明H2S在炎性痛中也发挥了调节作用[1-2]。 1材料和方法 1.1动物和分组雄性SD大鼠40只，体重200～250g，由徐州医学院实验动物中心提供。动物饲养适应环境24h后进行实验，随机分为5组(n=8)：疼痛模型组、人工脑脊液组、NaHS组、生理盐水组、PAG组。人工脑脊液组(20μl)和NaHS(Sigma公司，美国)组(40μmol/kg，20μl)在足底注射前5min进行鞘内注射;生理盐水组(1ml)和PAG(SigmaAldrich公司，美国)组(20mg/kg,1ml)在足底注射
6、前20min进行腹腔注射。 1.2大鼠鞘内注射先准备一个布套,开口以大鼠头部2倍大左右为宜(可用普通白线手套代替)。抓鼠尾将大鼠提起,张开套口顺势将大鼠头部放入,左掌压住袋口盖住鼠身,以拇中二指按压骶骨两侧固定,示指按在双侧骶骨前缘连线正中点皮肤上,摸出L5～L6间隙(由骶骨中线向上摸,可摸到一较突出棘突,为L5棘突,其下间隙为进针点)指示进针位点,右手持25μl微量进样器与脊柱上方约成60°～70°进针通过椎间隙触到骨质后,减小10°左右继续缓慢推进,以鼠尾突然出现侧摆或后腿突然出现抽动为成功标志。注入药物(容积=20μl)，时间约5
7、s,稍停2s后拔针[3]。 1.3大鼠甲醛实验行为学观察及评分大鼠甲醛足底炎性痛模型可靠经典，制造方法简单[4]。予5%甲醛50μl注射于大鼠一侧足底皮下，即可造成大鼠局灶炎性痛。注射后立刻出现自发痛行为反应。此疼痛行为反应呈双相性：第一相反应持续0～15min，0～5min疼痛行为反应达高峰，5～15min明显减弱;第二相反应从15min持续至60min，并出现明显的化学刺激性局部炎性反应。2h后大鼠足部的水肿更加明显，可持续24h不消退。 根据Din内行为学变化评分值。行为学观察采用双盲法，自足底注射后每5min记录一次。大鼠疼痛
8、行为分为4级：0级——两足后足掌平放在地面，活动无异常;1级——注射足掌轻微接触地面，活动时有跛行;2级——注射足抬起，不接触地面;3级——大鼠舔咬或拍动注射足。疼痛加权评分(paininte
