黄酒中氨基酸测定方法行业标准

《黄酒中氨基酸测定方法行业标准》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、××/T××××—××××工业与信息化部发布××××-××-××实施××××-××-××发布黄酒中氨基酸的测定方法MethodforDeterminationofaminoacidsinricewineHPLCMethod（征求意见稿）QB/T××××—××××QB中华人民共和国轻工行业标准ICS1QB/T××××—××××目次前言II1范围12规范性引用文件13原理14试剂15仪器和材料16分析步骤27结果计算38重复性3附录A4附录B5IQB/T××××—××××前言本标准由全国食品发酵标准化中心提出并归口。本标准负责起草单位：本标准主要起草人：IQB/T××××—××××黄

2、酒中氨基酸的测定方法1　范围本标准规定了黄酒中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、4-氨基丁酸（Aba）、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Va1)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸（Trp）、赖氨酸(Lys)共18种氨基酸的高效液相色谱测定方法。本标准适用于黄酒中天冬氨酸(Asp)、赖氨酸(Lys)等18种氨基酸的测定，检出限为3.0mg/L。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的

3、引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规则和实验方法3　原理采用异硫氰酸苯酯衍生剂与黄酒中氨基酸进行衍生反应，氨基酸衍生产物在特定紫外波长有强吸收，经C18色谱柱分离后，紫外检测器检测，外标法定量分析。4　试剂4.1　乙腈:色谱纯。4.2　甲醇：色谱纯。4.3　异硫氰酸苯酯(≥99%)。4.4　异硫氰酸苯酯的乙腈溶液：移取0.12mL异硫氰酸苯酯(4.3)至10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。4.5　三乙胺：分析纯。4.6　三乙胺的乙腈溶液：移取1.40mL三乙胺(4.5)至10mL

4、容量瓶中，用乙腈定容至刻度。4.7　乙酸钠：分析纯。4.8　正己烷：分析纯。4.9　冰乙酸（99.0%）。4.10　10%乙酸溶液：取1mL冰乙酸(4.9)用高纯水稀释到10mL。4.11　浓盐酸:分析纯。4.12　0.1mol/L盐酸溶液：取0.90mL浓盐酸（4.11）,用水定容至100mL。4.13　氨基酸标准物质：纯度≥98%。4.14　标准储备液：准确称取各氨基酸标准品0.1000g（精确至0.1mg），用0.1moL/L盐酸（4.12）溶解后，定容至10mL混匀，使其浓度为1.0mg/mL，储存在-20℃下有效期为1年。4.15　标准工作液：准确量取标准储备液（4.1

5、4），用水稀释，依次配制成10μg/mL，20μg/mL，40μg/mL，60μg/mL，80μg/mL的标准溶液，现配现用。4.16　水：GB/T6682二级水。5　仪器和材料5.1　高效液相色谱带有紫外检测器或二极管阵列检测器。5QB/T××××—××××1.1　分析天平（精度0.1mg）。1.2　漩涡混合器。1.3　2ml塑料离心管。1.4　微孔有机滤膜：孔径0.45μm。2　分析步骤2.1　样品衍生取黄酒样品1.0mL，用水定容至10ml容量瓶中混匀，取200μL稀释后的酒样，置于2mL离心管中,再加入异硫氰酸苯酯的乙腈溶液(4.4)100μL、三乙胺的乙腈溶液(4.6)

6、100μL，混匀，室温下放置1h后，加入30μL乙酸溶液（4.10）。2.2　萃取净化在离心管中加入400μL正己烷（4.8）,漩涡混合器振荡1min，静置10min，用注射器吸取下层溶液,经0.45μm有机滤膜过滤，收集滤液待测定。2.3　标准样品前处理分别移取200μL系列标准工作液（4.15）。置于2mL离心管中,加入异硫氰酸苯酯的乙腈溶液(4.4)100μL、三乙胺的乙腈溶液(4.6)100μL，混匀，室温下放置1h后，加入30μL乙酸溶液（4.10）。按6.2进行萃取净化。2.4　色谱条件2.4.1　色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）。2.4.2　流

7、动相及洗脱程序见表1。表1梯度洗脱顺序时间/min0.02mol/L乙酸钠(含0.5‰三乙胺,pH=6.20)乙腈/%水/%起始905539055128510525811092676.518.553065287406032845080205308020540109059010906090557090552.4.3　流速：1.0mL/min。2.4.4　进样体积：10μL。2.4.5　柱温：38℃。2.4.6　检测波长：254nm。2.5　定性根据氨基酸标准样品的保留时间，与待测样