胶质细胞活化对慢性前列腺炎-慢性盆腔疼痛综合征(

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1、胶质细胞活化对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(【摘要】　　目的探讨胶质细胞活化对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(chronicprostatitis/chronicpelvicpainsyndromes,CP/CPPS)大鼠脊髓背角P物质的影响。方法完全福氏佐剂和3%角叉菜胶前列腺内注射造成CP/CPPS模型，脊髓插管给药胶质细胞活化抑制剂Propentofylline干扰CP/CPPS模型大鼠，免疫组织化学方法观察正常组、疼痛模型组、药物干扰组脊髓节段(L6和S1)背角的胶质细胞的活化和P物质的定性定位，并用放射免疫的方法观察三组脊髓背角P物质的变化。结

2、果脊髓背角胶质细胞活化阳性细胞数疼痛组明显增加，药物干扰组明显减少；P物质主要表达于脊髓背角且疼痛模型组明显增多，药物干扰组明显减少。结论胶质细胞活化是CP/CPPS大鼠脊髓背角P物质变化的重要原因，胶质细胞活化抑制剂的应用将是治疗CP/CPPS的新亮点。【关键词】前列腺炎　疼痛　P物质　胶质细胞　　SubstancePofcornudorsalemedullaespinalisaffectedbyactivationofgliainratses　　ABSTRACT:ObjectiveToexploretherelationshipbetedullaespin

3、alisinratses(CP/CPPS).MethodsThemodelsofCP/CPPSodels.TheactivationofgliaandsubstancePinthespinalcordmunohistochemistryandthechangeofsubstancePmunity.ResultsActivationofgliaodelsandsignificantlyreducedininterferedgroups,andsubstancePodelsandsignificantlyreducedintheinterferedgroups.C

4、onclusionTheactivationofgliainthespinalcordportantreasonofthechangeinsubstancePexcretedfromcornudorsalemedullaespinalis.Inhibitorofgliaactivationes,CP/CPPS)是泌尿门诊的常见病，疼痛是患者就诊的主要原因，严重影响了患者的生活质量，所以对慢性前列腺炎患者疼痛机制的探讨尤为重要，但国内外在这方面研究并不多。P物质(substanceP,SP)是中枢神经系统内疼痛的重要调质和递质，它被认为是脊髓伤害性信息的传递物质

5、，在脊髓痛觉信息传递过程中发挥着重要的作用，而越来越多的研究发现胶质细胞，主要是星形胶质细胞和小胶质细胞，不仅仅起支持和营养作用，还参与中枢疼痛的调控，所以本实验旨在观察CP/CPPS大鼠模型中胶质细胞活化是否能致脊髓背角P物质的改变，特别是胶质细胞活化抑制剂能否减少脊髓背角P物质的释放，从而为从胶质细胞活化抑制这个角度为临床诊治CP/CPPS疼痛提供新的靶位线索。　　1材料与方法　　1.1动物分组60只健康雄性SpragueDaa公司)和完全福氏佐剂30μL(pleteFreund,sadjuvant,Sigma公司)，可吸收线缝合伤口，正常饲养4周备用。

6、　　1.3脊髓插管给药CP/CPPS疼痛模型的大鼠麻醉后暴露并切开寰枕后膜，经切口向脊髓蛛网膜下腔插入外径0.61mm、全长12cm的PE10聚乙烯管，插入长度为6-7cm，达到腰膨大处，3周后每次经导管注入10%胶质细胞活化抑制剂Propentofylline(Sigma公司)10μL，后用10μL生理盐水冲洗，每日1次，连用1周。　　1.4SP的检测每组10只大鼠腹腔注射过量的25g/L戊巴比妥钠麻醉，断头处死，迅速取出L6和S1段脊髓背角，置-70℃冰箱备用。用打孔法取脊髓后角，按文献[2]的方法进行提取并作SP的放免测定。放免试剂盒由第二军医大学提供

7、，结果以pmol/10mg湿重组织表示。　　1.5免疫组织化学染色和胶质活化阳性细胞计数每组10只腹腔注射过量的25g/L戊巴比妥钠麻醉，经左心室灌注250mL0.1mol/LPBS(pH7.4)清洗，700mL40g/L多聚甲醛PBS液(pH7.4)固定。取腰脊髓(L6S1)组织，40g/L多聚甲醛PBS液4℃过夜后入4℃300g/L蔗糖直至组织沉底。横向连续冰冻切片(25μm厚)，每隔5片取1片PBS液中备用。ABC法漂染，第一抗体GFAP工作浓度为1∶500，CD11B工作浓度为1∶200，SP的工作浓度1∶500(均为chemicon公司)。切片置于

8、一抗中4℃孵育过夜，第2天换液后，分别