外源性bfgf对鸡形觉剥夺性近视眼球后壁组织中v

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1、外源性bFGF对鸡形觉剥夺性近视眼球后壁组织中V【摘要】　　目的:观察外源性bFGF（basicfibroblastgrodeprivationmyopia,FDM）眼球后壁组织血管活性肠肽（vasoactiveintestinalpeptide,VIP）表达的影响。方法:将出生2d龄的40只来亨雏鸡随机分为对照组和实验组，两组右眼为遮盖眼，左眼为自身对照眼。对照组遮盖眼注射1g/L牛血清白蛋白（bovinescrumalbumin,BSA）溶液20μL，共10只鸡；实验组遮盖眼玻璃体腔注射bFGF1，2，4ng+1g/LBSA溶液20μL，每种剂量10

2、只鸡。1deprivationmyopiaofchickAbstractAIM:Toinvestigatetheexogenousbasicfibroblastgrodeprivationmyopia(FDM)ofchickretinal-choroids-sclera.METHODS:Fortytlyintocontrolgroupandexperimentalgroup.Therighteyesofthechickensalbumin(BSA),10chickensaggregated.Thecoveredeyesoftheexperimentalg

3、roupreceivedbFGF(1,2,4ng)+20μL1g/LBSA,munohistochemistrystainingandreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR).ThedataentalgroupandbyanalysisofSNK-qamongeachdosageintheexperimentalgroup.RESULTS:VIPlayerofretinalandchoroids;RNAofVIPinautocontroleyesbetRNAofVIPinexperiment

4、algroupanner(P＜0.05).CONCLUSION:ExogenousbFGFcouldup-regulatetheexpressionofVIPonretinal-choroids-scleraayplayanantagonisticactioninocularenlargementofchickenFDM.·KEYyopia;exogenousLiuSZ,JiangJJ,deprivationmyopiaofchick.IntJOphthalmol(GuojiYankeZazhi),2007;7(2):406-408　　0引言近视的发病机

5、制复杂，因此制约了近视眼的病因学治疗。近年来通过对实验性近视的研究发现眼内生物活性物质对眼球的生长起重要的调控作用，其中细胞因子、神经递质、激素、视黄酸都证实与近视的发生、发展有密切的关系。但是随着越来越多近视信使的发现与研究，也揭示了近视的发病机制不是一个简单的单通路信号传导过程，而是一个多种近视信使介导的多通路信号传导过程，诸多因素间存在着复杂的网络调控机制，因此深入了解各种近视信使之间的相互作用，是否存在协同或抑制作用，将有助于阐明近视的发病机制，并找到有效的治疗手段。碱性成纤维细胞因子（basicfibroblastgroL塑料试管底制成的眼罩遮

6、盖，左眼为未遮盖眼，作为自身对照眼。在12h∶12h的昼夜节律下进行普通饲养，饲养的动物室通风，室温保持在28～32℃,水和食物随意。分别向遮盖眼玻璃体腔注射药物20μL，均以牛血清白蛋白（bovinescrumalbumin,BSA）作为载体，BSA浓度为1g/L。随机将这40只雏鸡分为对照组（玻璃体腔注射1g/LBSA溶液20μL）和3种剂量梯度的bFGF实验组（玻璃体腔注射bFGF1，2，4ng+1g/LBSA溶液20μL）。bFGF(美国Protech公司)，BSA(美国Sigma公司），兔抗人VIP多克隆抗体工作液及SP-9001免疫组化试剂盒

7、（美国ZYMED公司），trizol、逆转录试剂盒、PCR试剂盒（美国Fermentas公司）。1.2方法雏鸡饲养1厚连续切片。免疫组化步骤按ZYMED公司SP法操作，以PBS代替一抗做阴性对照，胞质出现棕黄色颗粒状沉积为VIP阳性表达。另以Trizol常规提取RNA，用DU-70紫外分光光度计测量RNA质量和浓度，A260/280比值为1.8～2.0。以10g/L甲醛变性凝胶电泳三条带显示清晰来证实RNA完整。逆转录获得cDNA。以cDNA为模板，PCR扩增VIP的目的基因。依照美国生物信息中心（NCBI）提供的基因库（GenBank）中查找雏鸡VIP

8、的序列（序列号：NM205366）设计PCR扩增引物，使用Primer5软件设计