巩膜后极部巨噬细胞在小鼠形觉剥夺性近视中作用的研究

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1、温州医学院硕士学位论文巩膜后极部巨噬细胞在小鼠形觉剥夺性近视中作用的研究姓名：王乐丹申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：瞿佳2012-05-18温州医学院硕士学位论文巩膜后极部巨噬细胞在小鼠形觉剥夺性近视中作用的研究中文摘要目的巩膜后极部细胞外基质的重塑是近视及其致盲性并发症发生过程中非常重要的一个环节，但是目前其机制知之甚少，阻碍了对近视发生发展机制的认识。本研究将观察巩膜后极部巨噬细胞在小鼠形觉剥夺性近视中的变化，以及研究后极部巨噬细胞对小鼠屈光发育及近视的影响。方法1小鼠形觉剥夺性近视模型的建立。采用出生后23日龄的野生型(wildtype，

2、WT)C5781_／6小鼠作为实验动物，随机分成形觉剥夺性近视诱导组(FDM组)和对照组两组。FDM组小鼠都取右眼进行单眼形觉剥夺，对照组小鼠不作任何处理，正常饲养。在形觉剥夺2周和4周后检测各组小鼠屈光度(EIR检测)、眼球生物学参数(OCT检测，包括角膜厚度、前房深度、晶状体厚度、玻璃体腔深度、视网膜厚度及眼轴长度)、角膜曲率和体重等。2巨噬细胞在近视发生发展中变化趋势的检测。巨噬细胞在体内存在M1和M2两种亚型，F4／80在M1型和M2型中都存在，而CD206只存在于M2型巨噬细胞，因此可通过免疫荧光双染特异性地区分巩膜组织中M1和M2型巨噬细胞

3、：标记F4／80的细胞认为是总的巨噬细胞，同时标记F4／80和CD206的细胞则认为是M2型细胞，标记F4／80而没有标记CD206的细胞认为是M1型巨噬细胞。本研究将获取正常对照组(5周龄和7周龄正常小鼠)的巩膜、形觉剥夺组(形觉剥夺2周和4周)的巩膜组织，采用免疫荧光双染标记巨噬细胞，通过细胞计数的方法，比较两组动物巩膜后极部巨噬细胞(总M和M2)数量的差异。结果1WT小鼠形觉剥夺2周：形觉剥夺眼相对于对侧眼和对照组都形成了明显的近视，形觉剥夺眼向近视方向漂移(T：．0．60+2．29；F：2．27+2．65；n=6；P=0．003；配对样本t检验

4、。T：．0．604-2．29；C：5．29+3．32；n=6；P=0．006；独立样本t检验)，同时伴有眼轴延长(T：o．15．{-0．04；F：0．154．0．02；C：o．14+0．02；n=6)和玻璃体腔深度的改变(T：．0．034．0．04；F：．0．04士O．02；C：一O．044．0．02；n=6)。小鼠形觉剥夺之后巩膜后极部有巨噬细胞(主要是M2型)富集，形觉剥夺眼和对侧眼总巨噬细胞和M2型巨噬细胞数量多于对照组：总巨噬细胞数量是(T：67．83士35．19；F：66．174．41．32；C=12．33+4．27；n=6)；M2型巨噬细胞

5、数量为(T：62．50+35．58；F：63．004-42．32；C=12．334-4．27；n=6)。温州医学院硕士学位论文2WT小鼠形觉剥夺4周：形觉剥夺眼相对于对侧眼和对照组近视程度加深，形觉剥夺眼屈光度度数也明显加深(T：．2．40+1．65；F：2．39+1．16；n=5；P=0．001。T：．2．40-4-1．65；C：2．83士0．74；n=5；P=0．001)，同时伴有眼轴延长(T：0．24+0．03；F：0．20+0．01；n=5；P=0．006。F：0．20士0．01；C：0．24士0．03；n=5；P=0．014)和玻璃体腔深度的

6、改变(T：．0．03+0．03；F：．0．08土0．021n=5；P=0．004)。形觉剥夺眼总巨噬细胞的数量相对于对照组有统计学意义(T：61．2士32．5；C：22．0-4-13．7；n=5；P=0．038)，M2型巨噬细胞数量也有统计学差异(T：58．0士30．6；C：18．4+9．13：n=5；P=0．024)；形觉剥夺小鼠对侧眼总巨噬细胞的数量比较对照组具有统计学意义(F：54．4士27．03；C：22．0士13．7；n=5；P=0．044)，但是M2型巨噬细胞数量却没有统计学意义(F：41．8+27．4；C：18．4士9．13；n=5；P=

7、0．108)。结论WT小鼠形觉剥夺2周和4周后，形觉剥夺眼和对侧眼的总巨噬细胞数量比对照组明显增多，而且主要是M2型巨噬细胞。因此，巩膜后极部巨噬细胞可能参与小鼠屈光发育和近视的形成。【关键词】小鼠；巨噬细胞；近视；FDM7温州医学院硕士学位论文ResearchoftheRoleofMacrophagesinthePosteriorScleraPlayedinMiceFDMAbstractPurposeRecentfindingsindicatedthattheremodelingofscleralextracellularmatrix(ECM)int

8、heposteriorscleraplaysanimportantroleinthedevel