survivin、bcl2在i期nsclc中的

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1、Survivin、Bcl2在I期NSCLC中的【摘要】目的手术后I期非小细胞肺癌的预后情况与众多因素有关，凋亡相关基因在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的作用。本研究通过检测凋亡相关基因Survivin及Bcl2在I期非小细胞肺癌中的表达情况，探讨其在I期非小细胞肺癌的临床意义和预后价值。方法利用免疫组化学技术检测85例I期非小细胞肺癌（NSCLC）及20例肺良性肺组织中Survivin和Bcl2的表达，统计分析这两者在I期非小细胞肺癌的作用。结果85例I期非小细胞肺癌组织中Survivin和Bcl2的表达率分别为64.7%(55/85)和52.9％（45/8

2、5）与正常肺组织中的表达差异显著（P<0.05）；多因素分析显示PTNM分期与Survivin蛋白的阳性表达是I期非小细胞肺癌患者独立预后因素（P<0.01），Survivin、Bcl2蛋白的表达与临床、病理各因数无相关。结论在I期非小细胞肺癌中，凋亡相关基因Survivin及Bcl2可能对肿瘤的发展与预后产生一定的作用与影响；PTNM分期与Survivin蛋白的阳性表达是此Ⅰ期非小细胞肺癌术后患者的独立预后因素。【关键词】肺肿瘤；癌；非小细胞性；Survivin；Bcl2ABSTRACT：ObjectiveToinvestigatetheexp

3、ressionoftherepresentativeapoptosisrelatedoncogenesurvivinandBcl2instageInonsmallcelllungcanceranditsclinicalvalue.MethodsTheexpressionofsurvivinandBcl2munohistochemistryassayin85NSCLCstageIsurgicalspecimensand20benigndiseasespecimens.ResultsThepositiveratesofsurvivinandBcl2ouran

4、dnontumour(P<0.05).PTNMstageandpositiveexpressionofsurvivinaybeimportanttotheoccurrenceanddevelopmentoflungcancer;PTNMstageandpositiveexpressionofsurvivinareindependentprognosticfactors.KEY病理分期标准。所有组织(肺肿瘤组织与非肿瘤肺组织)均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片。1．2临床病理资料收集回顾性收集85例患者的年龄、性别、病理类型、临床分期等资料

5、，所有病例随访完全，生存时间按月计算。1．3试剂与方法Survivin和Bcl2抗体由北京中山公司提供，SP9000试剂盒由北京中山公司提供。采用LSAB法。将石蜡标本以5μm层厚切片，烤干，于二甲苯液中脱蜡，不同浓度的乙醇中脱水，3％的H2O2溶液消除内源性过氧化物酶的活性，EDTA（PH8.0）修复液常规修复，玻片封闭，孵育盒中抗体孵育，抗原暴露，加入山羊血清，依次滴加一抗、二抗、三抗，DBA显色，苏木精复染，烘干封片。（Survivin的抗体工作浓度为1:100，PBS液代替一抗、二抗作为阴性对照）。1.4结果判断Survivin染色结果评估采用综合计分法

6、，细胞染色强度分为3级:1：浅黄色为弱阳性(+),2：中度阳性(++),3:阳性(+++)。在400×光镜下随机观察5个不同视野,根据阳性细胞占总细胞数的百分率分为5个等级:0级,<5.0%:1级,5.0%～25.0%;2级,26.0%～50.0%:3级,51.0%～75.0%和4级,>75%。用细胞数分级和强度分级的乘积作为判断Survivin的表达结果,若乘积≤1为阴性,反之则为阳性；Bcl2染色结果评估采用在400倍光镜下随机观察5个不同视野，着色细胞数≥10％判断为阳性，＜10％判断为阴性。免疫组化结果由两位病理医师盲法读片得出。1．5统计分

7、析采用SPSS10.0软件包进行统计学分析，Survivin、Bcl2在NSCLC及肺良性肿瘤中的表达差异采用χ2检验，应用COX风险回归模型进行多因素分析，Survivin、Bcl2在肺癌组织中表达与各临床、病理因数的相关性采用χ2检验，统计中将P<0.05视为有统计学意义。2结果2．1Survivin、Bcl2蛋白在肺癌组织与非肿瘤组织中的表达Survivin、Bcl2蛋白在肺癌组织中的表达率分别为64.7%（55/85）和52.9%（44/85），肺非肿瘤组织中的表达率分别为10.0%（2/20）和15.0%（3/20），可见两组表达率有非常显

8、著性差异（