一氧化氮在大鼠单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸早期损伤

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1、一氧化氮在大鼠单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸早期损伤【摘要】目的:了解单侧睾丸扭转后对侧睾丸早期的病理改变及组织中一氧化氮（NO）含量的变化，阐明NO与对侧睾丸早期损伤之间的关系。方法:将56只青春期前SD大鼠随机分为假手术组和扭转组，每组28只。假手术组将左侧阴囊打开分离暴露睾丸后，不予扭转，即将睾丸再固定于阴囊壁上，并缝合阴囊。扭转组则依Turner法建立左侧睾丸扭转模型，均于扭转4h后复位。两组分别于复位后1h、4h、24h、1周各处死大鼠7只，取右侧睾丸行一氧化氮合酶（NOS）活性、NO含量、丙二醛（MDA）含量检测及病理评分。结果:与假手术组比较，扭转组对侧睾丸的

2、MDA含量、NO含量、NOS活性、病理评分等均有不同程度升高，且生精细胞层数结合精细小管直径所示的预后情况亦较差。结论:单侧睾丸扭转后对侧睾丸早期即可出现继发性损伤，过量NO在单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸早期损伤中起主导作用。【关键词】一氧化氮一侧睾丸扭转对侧睾丸损伤机制Abstract:Objective:Toinvestigatethebiochemicalandhistologicalchangesincontralateraltestesofratsechanismofcontralateraltestisinjury.Methods:56prepubertalS

3、prague-Dalydividedinto2groups,28ratsineachgroup.Ratsingroup1underoperationofthelefttestesundergeneralanaesthesia.RatsinGroup2underilaroperationbutthelefttestesaintainedbyfixingthetestestothescrotum,thendetorsioned.Alltheright(untovedfromratsat1hour,4hour,24hour,1eachgroupeachtime.Thenthe

4、biochemicalparameterssuchasmalondialdehyde(MDA),nitricoxide(NO),nitricoxidesynthase(NOS)activityiniferoustubulediameteroperationgroup),thebiochemicalparametersandhistologicalgradeseanseminiferoustubulediameter,thereayoccurinearlytimeafterunilateraltesticulartorsion/detorsion,andtheprofus

5、etissueNOconcentrationmayplayasignificantroleinthecontralateraltestis.Keyechanism睾丸扭转，即精索扭转，可引发精索内营养血管箝闭，除致同侧睾丸急性缺血损伤外[1]，还可能致对侧睾丸不同程度的受损[2]。据Skoglund统计，该病主要集中于青春期前发病，平均发病年龄为14.9岁[3]。本研究拟通过动物实验证明单侧睾丸扭转后对侧睾丸早期是否可出现损伤，并试图阐明过量NO在对侧睾丸早期损伤中的作用。1材料和方法1.1动物分组选取出生约28～30d（青春期前）的健康雄性SD大鼠56只，体重150～

6、200g，随机分为假手术组、安慰剂组，每组28只。1.2动物模型建立所有大鼠均在术前以25%乌拉坦行腹腔注射全麻。假手术组将左侧阴囊打开，分离暴露左侧睾丸后即予固定缝合。扭转组依Turner法建立左侧睾丸扭转模型[4]:左下腹小切口，游离左侧睾丸，切断睾丸引带，分离周围组织至附睾头。睾丸顺时针扭转720°，固定扭转侧睾丸防止自然复位，维持4h后原切口打开复位扭转睾丸,关闭切口。1.3标本制备各组大鼠分别于术后1h、4h、24h、1周时快速脱颈法处死7只，采集未扭转侧睾丸标本，将所有睾丸标本沿中轴切开分为两部分，一部分睾丸用于制备组织匀浆，另一部分睾丸迅速置于10%的中性

7、福尔马林中待制作石蜡切片常规HE染色。1.4检测方法1.4.1生化指标检测：按试剂盒要求制备组织匀浆；以硝酸还原酶法测定NO含量，化学比色法测定丙二醛（MDA）含量与NOS活性。均严格按照试剂盒说明书操作。1.4.2睾丸组织病理学检查：置于光镜下镜检，观察睾丸曲细精管结构，计数生精上皮层数，测量平均曲细精管直径（MSTD），对睾丸组织结构依Cosentino法[5]评分，详见图1～4。1.5统计学处理方法用SPSS13.0统计软件进行分析，相关性用Pearson法检验，多组比较用单因素方差分析，组间两两比较方差齐性用LSD检验，方差不齐性