不同诱导子对泽泻中23

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1、不同诱导子对泽泻中23李清ａ，周以飞ａ，刘崟艳ｂ，柯兰兰ｃ，霍昱璟ｃ，潘大仁ｃ（福建农林大学，ａ．作物科学学院；ｂ．农村发展学院；ｃ．生命科学学院，福州３５０００２）摘要：采用不同浓度的水杨酸、赤霉素和脱落酸处理泽泻植株，研究不同诱导子对泽泻中２３－乙酰泽泻醇Ｂ积累的影响。结果表明，水杨酸、赤霉素和脱落酸在低浓度下都能促进泽泻中２３－乙酰泽泻醇Ｂ的积累，在高浓度下则表现出一定的抑制作用。１５０μｇ／ｍＬ的水杨酸处理第８天时，２３－乙酰泽泻醇Ｂ的含量为７１５．４μｇ／ｇ，为所有处理中的最大值。赤霉素和脱落酸的处理效果与水杨酸相比较差。..关键词：泽泻；２３－乙酰泽泻醇Ｂ；诱导子中

2、图分类号：Ｑ９４９．７１＋２．５文献标识码：A：0439－８114（２０15）05－1125-05DOI：10.14088/j.ki.issn0439-8114.2015.05.025收稿日期：２０１４－０６－３０简介：李清（１９８８－），男，河南信阳人，硕士，研究方向为作物遗传育种，（）１８６５０７３２４８０（电子信箱）ｌｉｑｉｎｇｓｔｕｄｙ＠１６３．ｃｏｍ；通信，潘大仁（１９４９－），男，教授，博士生导师，（）０５９１－８３７５９４５９（电子信箱）ｐｄｒ８５９８＠１６３．ｃｏｍ。泽泻是一种常见的中药材，是由泽泻科（Ａｌｉｓｍａｔａｃｅａｅ）多年生植物泽泻［Ａｌｉｓｍａｏｒｉ

3、ｅｎｔａｌｅ（Ｓａｍｕｅｌｓ）Ｊｕｚｅｐ．］的块茎干燥炮制而成。泽泻性味甘淡寒，归肾、膀胱经，具有利水渗湿、泄热和化浊降脂的功效，用于小便不利、水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛和高血脂等［１］。泽泻的主要化学成分为三萜类物质，其中最主要的药用成分为２３－乙酰泽泻醇Ｂ［２］。近年来，随着人们对２３－乙酰泽泻醇Ｂ的深入研究，发现２３－乙酰泽泻醇Ｂ具有很多非常重要的生物活性［３］，如抗癌［４］、诱导多种肿瘤细胞的凋亡［５］和抑制乙肝病毒抗原活性［６］等作用。诱导子（Eｌｉｃｉｔｏｒｓ）是一种特殊的诱发因子，能够开启植物体内代谢过程中酶的活性，因而能够显著地增加植物中次生代谢产物

4、的含量，有时候甚至能诱导植物产生出新的次生代谢产物。目前，诱导子已经广泛应用于许多中药材次生代谢产物的生产中，如人参［７］、鱼腥草［８］、丹参［９］、藏红花、黄芩等。但是诱导子在泽泻中的研究却鲜有报道。为此，试验采用水杨酸、赤霉素和脱落酸三种诱导子分别处理泽泻，研究泽泻中２３－乙酰泽泻醇Ｂ含量的变化。１材料与方法１．１材料试验于２０１３年７月至２０１４年１月在福建农林大学试验田进行，供试材料泽泻种子为福建中医药大学吴锦忠教授提供。泽泻种子于2013年７月８日播种育苗，苗期４０ｄ，2013年８月１８日移栽至大田，大田前作为水稻。试剂：乙腈为色谱纯（德国Ｍｅｒｃｋ公司），水为娃哈哈

5、超纯水，标准品２３－乙酰泽泻醇Ｂ购于国家标准物质信息中心，水杨酸、赤霉素、脱落酸、无水乙醇、石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等均为国产分析纯。仪器：烘干箱（上海精宏）、ＦＹ１３５中草药粉碎机、ＢＳ１２４Ｓ型电子天平、３２００ＩＨ型超声波清洗器、ＵＶ１７００－１８００紫外可见分光光度计（上海凤凰光学科技有限公司）、美国Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱仪、Ｗａｔｅｒｓ２９９６检测器。１．２方法１）试验设计。选择植物形态、营养状况相近的盆栽泽泻植株４５盆，３次重复，每个重复１５盆。在相同的栽培条件，将１５盆泽泻分成３组放置于水田中，每组５盆纵向摆放，保持４０ｃｍ的间距，每组喷施一种不同种

6、类的诱导子（水杨酸、赤霉素、脱落酸），每组中５盆植株喷施的诱导子的浓度分别为０、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬ（诱导子都采用１％乙醇溶解）。喷施诱导子之前取样一次作为对照，之后在处理的第４、８、１２、１６天分别取样一次，采用高效液相色谱法检测各个样品中２３－乙酰泽泻醇Ｂ的含量。２）标准品溶液的制备。称取标准品２３－乙酰泽泻醇Ｂ４ｍｇ，置于５ｍＬ的离心管中，取４ｍＬ色谱纯乙腈短暂超声混匀，制成１ｍｇ／ｍＬ的标准品储备液。０．２２μｍ滤头过滤备用。３）材料准备。泽泻样品在烘干箱中经６０℃干燥至恒重。干燥后的样品用ＦＹ１３５中草药粉碎机粉碎，过８０目筛，备用。精密称取样品粉末

7、０．３ｇ，加入２０ｍＬ石油醚，超声处理（功率２００Ｗ，频率４０ｋＨｚ）３０ｍｉｎ，滤纸过滤。滤液经旋转蒸发仪蒸干，加入１ｍＬ色谱纯乙腈溶解蒸干的样品，溶液用０．２２μｍ滤头过滤，备用［１０，１１］。４）统计分析。数据采用Ｅｘｃｅｌ和ＤＰＳ软件进行分析。２结果与分析２．１２３－乙酰泽泻醇Ｂ的检测采用高效液相色谱法检测，色谱柱：ＷａｔｅｒｓＣ１８柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；柱温：室温；流动相：乙腈－水（８０∶２０，V/V）；流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长：２０８ｎｍ；进样量：２０μ