补肝养髓方对老年性痴呆模型皮质神经元 rna 和

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1、补肝养髓方对老年性痴呆模型皮质神经元RNA和【摘要】目的：探讨补肝养髓方对自发老年性痴呆模型皮质神经元RNA和Nissl体的影响。方法：从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆（记忆障碍）鼠，随机分为4组即空白对照组（老年性痴呆组）、西药对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组、另设老年学习记忆正常组（老年正常组）。用跳台实验检测学习记忆成绩；脑组织冰冻切片，细胞化学方法显示大脑皮质神经元内RNA和Nissl体，全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区RNA和Nissl体含量。结果：补肝养髓方能显著改善自发老年性痴呆

2、模型小鼠的学习记忆障碍，并明显增高大脑皮质锥体细胞的RNA和Nissl体含量，而且其作用呈现出一定的量效关系。结论：补肝养髓方改善自发老年性痴呆模型学习记忆障碍的机理可能与促进调节其大脑皮质的RNA代谢，改善学习记忆关键脑区的神经元结构有关。【关键词】老年性痴呆；补肝养髓方；RNA；Nissl体；大脑皮质；小鼠〔Abstract〕ObjectiveToinvestigatetheeffectsofBuganYangsuiformulaontheRNAandNisslBodiesofcerebralcortexneur

3、oninageddementiamice.MethodsSpontaneousageddementiamice21monthsoldKunmingmiceandthenlyinto4groups,namelycontrol,edicine,loulaandhigherdosageBuganYangsuiformulagroup.Inaddition,normalagedmicegroupadetofrozensection.Usingcytochemistrymethodtoshoaticmicro-imageana

4、lysissystemtodeterminequantitatively.ResultsBuganYangsuiformulacouldimprovetheimpairmentoflearningandmemoryinspontaneousageddementiamice,anditcouldsignificantlyimprovetheRNAmetabolismofcerebralcortexneuronsasanner.ConclusionBuganYangsuiformulacouldremarkablypro

5、motetheRNAmetabolismandimprovethestructureofneuronsrelevanttolearningandmemoryinspontaneousageddementiamice.〔KeyouseRNA是细胞内重要的生物大分子，通过指导和调控细胞内蛋白质的生物合成调控着细胞的新陈代谢[1]，老年性痴呆患者RNA代谢异常[2]；而Nissl体是神经元内蛋白质合成的场所，其数量与细胞代谢水平有关[3]。因此，本研究观察了补肝养髓方对老年性痴呆小鼠皮质神经元内RNA和Nissl体含量的影

6、响。1材料与方法1.1自发老年性痴呆小鼠的筛选及分组给药雄性昆明种小鼠，13月龄，购自中山医科大学实验动物中心。饲养至21月龄，按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选自发老年性痴呆学习记忆障碍小鼠[4-6]。将筛选出的老年性痴呆鼠52只随机分为4组，分别为空白对照组、西药对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组，每组13只，另以13只筛选出的老年学习记忆正常鼠作为正常对照组。西药对照组给以Hydergine0.6mg/kg，补肝养髓小、大剂量组分别予正交优化的补肝养髓方6.80g/kg及20.41g/kg，以上均研配

7、成0.5mL液体灌胃给药，连续60d，正常对照组和老年性痴呆组均灌以等量双蒸水。1.2学习记忆功能检测给药观察第59天，灌胃1h后进行跳台训练，第60天给药1h后用MR-921型小鼠跳台实验自动记录仪以跳台试验检测学习和记忆成绩。1.3相关脑区RNA及Nissl体定性定量检测1.3.1取材切片给药观察及学习记忆检测结束后，每组随机取小鼠8只，经1%戊巴比妥纳（40mg/kg体重，腹腔注射）麻醉下开胸，左心室主动脉插管结扎，生理盐水50mL冲洗，续以冷的多聚甲醛戊二醛灌注固定液（含4%多聚甲醛、0.05%戊二醛、0.1

8、mol/L磷酸缓冲液pH7.2~7.4）灌注固定，取大脑于灌注液中后固定2h（4℃），然后入20%蔗糖缓冲液（0.1mol/L，pH7.4）中4℃24h。AO冰冻切片机冠状连续切片，片厚30m，切片收集于0.1mol/LPBS中待用。1.3.2孵育制片1.3.2.1RNA组化染色用Elias法[7，8]。①溶液配制：a：0.1mol/L醋酸缓冲