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时间:2018-11-01
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1、ApoE基因多态性、hsCRP与冠心病的相关性【摘要】目的分析载脂蛋白E(ApoE)的基因多态性、高敏C反应蛋白(hsCRP)含量与冠心病的相关性。方法采用酚氯仿抽提核酸法从凝血块中分离,应用聚合酶链反应(PCR),Hha1内切酶消化法对94例冠心病患者和100例健康对照组进行ApoE基因多态性进行检测;采用生化全自动仪,以乳胶增强免疫透射比浊法检测血清hsCRP含量。结果①ApoE等位基因频率:冠心病组与对照组比较,ε2等位基因频率明显降低(P<0.01),ε4等位基因频率升高(P<0.0
2、05);②血清hsCRP浓度,冠心病组显著升高(P<0.05),但不同等位基因之间,hsCRP无显著性差别(P>0.05)。结论联合监测ApoE基因多态性及血清hsCRP含量,对心血管疾病危险性的预测是敏感及有价值的指标。【关键词】载脂蛋白E;基因多态性;高敏C反应蛋白;冠心病 【Abstract】ObjectiveToanalyzethepolymorphismofapolipoproteinE(ApoE),andhighsensitivityCreactive protein(hs
3、CRP)levelsandtherelevanceofcoronaryheartdisease(CHD).MethodsPhenolchloroformextractiontheisolatedblocksbloodcoagulation.Polymerasechainreaction,Hhalendonucleasedigestionorphism.HsCRPleveleasuredbyimmunelatextransmissionturbidity.Results①ApoEallelefreq
4、uency:paredhsCRPconcentrationinCHDgrouporphismandserumhsCRParethesensitiveandvaluableindicators,orphism;HighsensitivityCreactive protein;Coronaryheartdisease 冠心病(CHD)是常见的多发病,是心血管系统疾病常见的死亡原因之一。研究认为,载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与CHD有一定的相关性〔1~3〕,冠状动脉粥样硬化并不是一种简单的脂质
5、沉积疾病,炎症是其重要特征,因此,CHD是一种炎性疾病。高敏C反应蛋白(hsCRP)与CHD的关系逐渐被临床广泛关注。本文对94例CHD患者血液进行AopE基因多态性及hsCRP浓度检测,旨在研究血清hsCRP、ApoE基因多态性与CHD的相关性。 1对象与方法 1.1研究对象CHD组94例,其中壮族42例,汉族52例,均为右江民族医学院附属医院心内科2007年1月至2007年8月住院CHD患者;男59例,女35例,年龄44~77岁,平均(60±12.7)岁,全部符合1979年世界卫生组织
6、修订的CHD诊断标准。对照组100例,均为同期住院的非CHD患者,并排除心脑血管疾病及肝、肾、内分泌等影响脂质代谢的疾病;男56例,女44例,年龄45~80岁,平均(65±10.8)岁。所有受试者在实验前均知情同意自愿参加本实验。 1.2方法 1.2.1ApoE基因多态性的检测 1.2.1.1DNA提取采空腹静脉血2.5~3.0ml,EDTA抗凝,用低渗溶血酚氯仿抽提白细胞核酸DNA,双蒸水溶解后作为模板。 1.2.1.2聚合酶链反应(PCR)扩增引物设计,而各等位基因组间无显著差异。
7、表1ApoE基因型和等位基因频率比较(略) 与对照组比较:1)P<0.01;2)P<0.05 2.2ApoE的基因型测定PCR扩增产物经Hha1酶切后,显示有不同的片段长度组合,可以进行ApoE基因型测定,即PCRRFLP分析方法。PCR扩增产物位于ApoE基因第4外显子内,涵盖2个突变位点〔6〕,产物长度为227bp。纯合子E2/2在91,81bp出现荧光条带;E3/3在91,48bp出现荧光条带;E4/4在72,48bp出现荧光条带;杂合子E4/2在91,81,72,48bp出现荧光条带;
8、E3/2在91,81,48bp出现荧光条带;E4/3在91,72,48bp出现荧光条带。见图1。 1:E3/3,2:E2/3,3:E2/4,4:E2/2,5:E3/4,6:E4/4;M:Marker 图1CHD患者ApoE不同基因型电泳图(略) 表2ApoE等位基因多态性与血清hsCRP含量关系(略) 与对照组对应等位基因比较:1)P<0.05 3讨论 ApoE基因有3个等位基因,即ε2,ε3和ε4,共构成6种不同的基因型:3种纯合型(ε2/ε2,ε3/
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