发表论文蛋白质精氨酸甲基转移酶1在先天性巨结肠中的表达

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1、蛋白质精氨酸甲基转移酶1在先天性巨结肠中的表达薛恩达1张明生11，山东宵聊城帘人民医院小儿外科【摘要】目的：检测蛋白质精氨酸甲基转移酶l（PRMTl）在先天性巨结肠（HD）患儿结肠狭窄段（HD组）及正常结肠组织（对照组）中的表达情况，探讨HD发病机制。方法：20例HD组标本取自狭窄肠段（无神经节细胞肠段），20例对照组标本取自正常肠段组织。通过WesternBlot实验分析肠段PRMT1蛋白表达量；通过免疫组织化学实验观察PRMT1在结肠各层组织细胞中的表达情况。结果：在对照组粘膜下层与肌间神经丛PRMT1显著表达，HD组没有PRMT1的明显

2、表达（p〈0.05）,结论：结肠组织PRMT1表达量减少可能导致HD发生；PRMT1作为一种标志物来诊断HD有一定价值。关键词：蛋白质精氨酸甲基转移酶1;先天性巨结肠；蛋白印迹实验；免疫组化[Abstract]Objective：Inthisstudy，wewilldetectthePRMT1expressioninthecolonsegmentsfromHDpatientsandcontrolgroup.WewillstudythepathogenesisofHD•Methods：Tissuessampleswereobtainedfrom

3、fortypatients(twentyHDpatientsandtwentynon-HDpatients).WesternBlotanalysedthePRMT1proteinlevelsincolonsegments.ImmunohistochemistrywasusedtodetectPRMT1expressionindifferentlayersofcolontissuecellfromHDpatientsandcontrolgroup.Result：IntensivePRMT1expressionwasdetectedinbotht

4、hesubmucosalandthemyentericplexusesfromthecontrolgroup.ThecolonsegmentsofHDpatientswerenotmarkedlylabeledwithPRMT1(p<0.05).Conclusions：PRMT1expressionshouldbeusedtoinvestigatethepathogenesisandasausefulmarkerforthediagnosisofHD.Keywords：PRMT1；HD;WesternBlot;Immunohistochemi

5、stry先天性巨结肠（Hirschsprung'sdisease，简称HD）是一种肠神经系统（Entericnervoussystem,简称ENS）异•常发育的痰病，又称为无神经节细胞症。PRMT1RXA或蛋白在不同的生物种类研究中均得到表达，如白鼠［1］、家鼠［2］、鱼［3］等，Mathioudaki等报道PRMT1在结肠癌组织的细胞内的表达。在本研宂中,将检测PRMT1在HD患儿结肠狹窄段（HD组）及正常结肠组织（对照组）中的表达情况，探讨HD发病机制。1.材料与方法1.1标本取自聊城市人民医院及聊城市第二人民医院2014年9月至2015

6、年10月间经手术治疗的患儿，先天性巨结肠组20例，年龄从4个月到5周岁，对照组20例，年龄从1天到15周岁，正常结肠组织分别取自：6例肠套叠行肠切除吻合术的患儿，4例自发性结肠穿孔切除修补术患儿，4例回盲部肿瘤切除术患儿，2例肠扭转肠切除吻合术患儿，2例外伤性结肠破裂患儿，2例淋巴组织异常增生患儿。1.2通过WesternBlot实验分析肠段PRMT1蛋白表达量；通过免疫组织化学实验观察PRMT1在结肠各层组织细胞中的表达情况。1.3数据采用SPSS17.0软件处理，WesternBlot凝胶图像PRMT1表达强度采用半定量数值（PRMT1/

7、P-Actin）,两组（HD组与对照组）间比较采用t检验；分别计数两组样本免疫组化切片粘膜下层、肌层随机3个高倍镜视野细胞深染群数之和，两组（HD组与对照组）间比较采用t检验。p<0.05为差异有显著性。2结果2.1WesternBlot分析结果PRMT1的表达水平通过WesternBlot分析，如图（1、2）示，PRMT1蛋白表达量在对照组明显较大，然而在HD组表达量明显减少，而P-Actin蛋白表达基本相当。PRMT1半定量（PRMT1/P-Actin）测定结果如表1,HD组明显少于对照组（t=一26.852p<0.01）。对照组对照组H

8、D组PRMTl图1PRMT1、e-Actin蛋白表达情况84O.0.uuafCJ/usd0JIff）组对照组图2半定量PRMT1表达量（PRMTl/p-Actin）