灯盏细辛抑制外源性 vegf诱导的大鼠视网膜血管病变tgfβ1的表达

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1、灯盏细辛抑制外源性VEGF诱导的大鼠视网膜血管病变TGFβ1的表达【摘要】　　目的：探讨灯盏细辛(EBHM)对外源性VEGF诱导的大鼠视网膜血管病变眼玻璃体腔TGFβ1和视网膜TGFβ1mRNA表达的影响。方法：大鼠48只随机分为rrVEGF164,rrVEGF164+EBHM,rrVEGF164+NS和正常对照4组。rrVEGF164+EBHM组每天60g/L的灯盏细辛浸膏ip。分别于不同时间收集玻璃体液后采用ELISA检测TGFβ1的浓度,并提取视网膜总的RNA后行RT-PCR检测TGFβ1mRNA的表达。结果：在2

2、RNA/GAPDHmRNA的差异与玻璃体内的TGFβ1浓度变化一致。结论：rrVEGF164作用大鼠玻璃体内TGFβ1浓度升高，视网膜TGFβ1mRNA表达增强。灯盏细辛能部分抑制rrVEGF164诱导的大鼠视网膜血管病变玻璃体内TGFβ1浓度的升高和视网膜TGFβ1mRNA表达的增强。【关键词】重组大鼠血管内皮生长因子　灯盏细辛　转化生长因子β1　　InhibitionofEBHMontheexpressionofTGFβ1intheretinalvasculopathyinducedbyexogenousVEGFin

3、ratsAbstractAIM:ToinvestigatetheeffectsofEBHMonTGFβ1inthevitreousandtheexpressionofretinalTGFβ1mRNAintheretinalvasculopathyinducedbyexogenousVEGFinrats.METHODS:Forty-eightratslydividedintofourgroups:rrVEGF164,rrVEGF164+NS,rrVEGF164+EBHMandnormalgroup.RatsinrrVEGF

4、164+EBHMgroupinistratedintraperitoneallyorandtotalextractedretinalRNARNAindifferenttimerespectively.RESULTS:TenteyesamongrrVEGF164,rrVEGF164+NSandrrVEGF164+EBHMgroupalgroup(P<0.05).TheconcentrationofTGFβ1inthevitreousofexperimenteyesinrrVEGF164+EBHMgroupRNAand

5、GAPDHmRNAineverygroupeasthatinthechangeofconcentrationofTGFβ1inthevitreous.·CONCLUSION:TGFβ1inthevitreousandexpressionofTGFβ1mRNAincreasedafterintravitrealrrVEGF164injection.EBHMhaspartialinhibitoryinfluncenceontheelevatedconcentrationofTGFβ1inthevitreousandexpre

6、ssionofTGFβ1mRNAintheretinalvasculopathyinducedbyexogenousrrVEGF164inrats.·KEY;TGFβ1　　0引言血管内皮生长因子(vascularendothelialgroinggroazz，EBHM]对其表达的影响。1材料和方法1.1材料Sprague-Dag/LrrVEGF1644μL，隔天1次，共4次。自身对照眼(左眼)，注射等量的0.1mol/LPBS，注射频率与实验眼一致。VEGF+EBHM组于玻璃体腔注射当天开始，按150mg/kg体重，60

7、g/L的灯盏细辛(EBHM)浸膏ip，每天1次。VEGF+NS组于玻璃体腔注射当天开始，按EBHM计量，生理盐水ip，每天1次。VEGF+EBHM，VEGF+NS组实验眼和自身对照眼玻璃体腔注射与VEGF组相同。每组分别于2s公司）,基因扩增仪（PE9600，美国PE公司）,TGFβ1ELISA试剂盒（上海森雄试剂公司）,扩增TGFβ1cDNA引物（上海生物工程有限公司）正义链：5′-GCTAATGGTGGACCGCAAC-3′,反义链：5′-GCAGTGAGCACTGAAGCGA-3′。扩增内对照GAPDHcDNA引物

8、（上海生物工程有限公司）正义链：5′-GTGCTGAGTATGTCGTGGA-3′，反义链：5′-CACAGTCTTCTGAGTGGCA-3′。RT-PCR试剂盒（Promega公司，美国），玻璃毛细管，重组大鼠血管内皮生长因子（rrVEGF164，Sigma公司）。1.2方法大鼠充分散瞳后，30g/L戊巴比妥钠溶液