大鼠整体低氧预处理减轻肺缺血再灌注损伤

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1、大鼠整体低氧预处理减轻肺缺血再灌注损伤【摘要】　　目的：探讨低氧预处理（HPC）对肺缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法：重复性低氧5次建立大鼠HPC模型，双活结套扎左侧肺门45min后再灌注120min复制肺I/R损伤模型；设立对照组、I/R组和HPC+I/R组，每组10只大鼠，检测各组肺组织湿重与干重比，肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活性。结果：I/R组大鼠肺组织湿重与干重比较对照组明显增加(P<0.05)，肺组织SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量和MPO活性明显增高(P

2、<0.05)；HPC+I/R组大鼠上述指标较I/R组均明显改善，差异有显著性。结论：大鼠整体HPC可能通过减轻氧化应激反应，保护肺的缺血再灌注损伤。【关键词】缺血;肺；再灌注损伤;低氧预处理;大鼠，Sprague-Daia-reperfusioninjuryinrats.Methods:HPCmodelesofrepetitivesublethalhypoxia.Thirtyratslydividedintothefolloia-reperfusioninjurygroup(groupI/R),andgroupHPC+I/R.I/Rinjur

3、ymodelratsunderinoflefthilarligationfolloinofreperfusion.Theratioofeasuredandcalculated.Thecontentsofmalondialdehyde(MDA),andactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD)andmyeloperoxidase(MPO)inlungtissueinedetry.Results:IngroupI/R,theaticallyhigher(P<0.05),SODactivityprovedia-repe

4、rfusion.Conclusion:DA）、髓过氧化物酶（MPO）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。主要仪器有：动物呼吸机（成都泰盟科技有限公司），低温高速离心机（德国,Eppendorf），核酸蛋白分析仪（美国,Bio-Tek），电热恒温鼓风干燥箱（上海路达实验仪器有限公司），754紫外可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）。　　1.2方法　　1.2.1低氧预处理（HPC）动物模型　　参考吕国蔚等[4]的方法，稍作改进。将大鼠放入620ml的广口瓶内，立即用橡皮塞密闭，当大鼠出现喘呼吸时,将大鼠取出并立即移入另一个相同容积的广口瓶内、密闭，如此

5、反复操作5次，建立低氧预处理模型。　　1.2.2肺I/R动物模型　　10％水合氯醛2ml/kg腹腔麻醉,气管插管,接动物呼吸机。经左前胸第5肋间开胸,游离左侧肺门,用生理盐水稀释肝素50U至500μl经尾静脉注入，5min后于肺充盈末用手术丝线通过肺门双活结套扎左侧肺门，45min后松开，再灌注120min。对照组左肺门穿线但不结扎。　　1.2.3实验分组　　（1）对照组：开胸后游离左肺门，穿线不结扎，不予其他处理；（2）肺I/R组：用手术丝线双活结套扎左肺门，45min后开放，再灌注120min；（3）HPC+肺I/R组：经HPC后的大鼠进行肺I

6、/R，方法同I/R组。　　1.2.4标本采集和处理　　实验结束后立即取出左肺，切取中下段肺组织约0.2g，置于新鲜配制的10％中性福尔马林固定24h，常规石蜡包埋切片，供HE染色；其余肺组织称重后-70℃冻存，以便分别进行各项生化指标检测及计算肺湿重与干重比。　　1.2.5肺组织湿重与干重比值　　取出已称重的冻存的肺组织，放置电热恒温鼓风干燥箱中，80℃连续烘烤24h后取出，在电子天平上分别称取肺组织干重，最后按公式计算：肺湿重与干重比值=（湿重-干重）/干重。　　1.2.6肺组织MDA含量、SOD活性、MPO活性　　严格按试剂盒说明书制备样品，并

7、用分光光度计测定吸光度值，再通过公式计算出组织匀浆液中的MDA含量、SOD活性和MPO活性。　　1.3统计学处理　　　　所有数据用均数±标准差表示，用SPSS10.0统计软件作统计学分析，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有显著性。　　2.2肺组织湿重与干重比值，见表1。结果表明HPC能减轻肺组织的I/R损伤，减轻肺水肿。表1各组肺组织湿重与干重比值（略）注：与对照组比较，(1)P<0.05；与I/R组比较，(2)P<0.05。　　2.3肺组织MDA含量及SOD、MPO活性见表2。结果提示HPC能有效地抑制肺I/R时的

8、氧化应激反应及中性粒细胞介导的作用。表2肺组织MDA含量及MPO、SOD活性的变化（略）注：与对照组比较，(1)P<