外源性Leptin减轻大鼠肺缺血再灌注损伤及其保护作用机制-论文.pdf

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1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(5)·603·外源性Leptin减轻大鼠肺缺血再灌注损伤及其保护作用机制龚文辉,张成鑫。,华天凤,汪裕琪,黄大可,赵强摘要目的研究大鼠肺缺血再灌注损伤后血清炎症因子机制。及肺组织相关酶活性的变化,并探讨外源性瘦素(Leptin)在1材料与方法肺缺血损伤中的作用及可能机制。方法建立大鼠肺缺血再灌注损伤模型,并用外源性LeNin干预治疗,对各组术后1.1动物及分组将30只健康成年清洁级大鼠随肺组织匀浆中丙二醛(MDA)、髓

2、过氧化物酶(MPO)、超氧化机均分成假手术组、缺血再灌注组及Leptin预处理物歧化酶(SOD)的活性、血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死组。实验动物均购自安徽医科大学实验动物中心,因子一(TNF一仅)和核因子一KB(NF—KB)浓度进行分析和比动物实验报安徽医科大学动物伦理委员会审批同较,并观察各组肺组织病理学改变。结果缺血再灌注组血意。清炎症指标CRP、TNF—、NF—KB浓度较假手术组明显升高,1.2主要试剂及仪器戊巴比妥钠购自美国Sig—用外源性Leptin预处理后的炎症指标浓度较缺血再灌注组有显著下降(P<0.

3、05)。肺组织匀浆MPO、MDA水平测定ma公司;10%多聚甲醛缓冲液、2.5%戊二醛溶液购结果同样显示Leptin预处理组的肺组织匀浆酶学指标较缺自上海谱振生物科技有限公司;丙二醛(malondial-血再灌注组有显著下降(P<0.05)。组织学病理显示缺血dehyde,MDA)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,再灌注组肺损伤严重;Leptin预处理组肺泡结构较完整,炎MPO)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,症改变相对较轻,水肿及出血较再灌注组明显减少。结论SOD)试剂盒购自南京

4、建成生物工程研究所;C反应运用外源性Leptin后肺缺血再灌注损伤明显减轻;外源性蛋白(C.reactiveprotein,CRP)、肿瘤坏死因子-0【Leptin对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与减轻脂质过(tumornecrosisfactor.Ot,TNF—Ot)和核因子-KB(nu—氧化反应及炎性细胞浸润有关。clearfactor-KB,NF·KB)ELISA试剂盒购自上海信裕关键词瘦素;肺损伤;肺保护;缺血再灌注生物科技有限公司;大鼠Leptin购自美国PeproTech中图分类号R655.3;R332.2

5、;R452中国公司。HX.300S小动物呼吸机购自成都泰盟科文献标志码A文章编号1000—1492(2014)05—0603一o4技有限公司。1.3实验过程参照相关文献及之前建立模型肺缺血再灌注损伤可见于体外循环、肺移植、休的经验J,建立大鼠肺再灌注损伤模型。术前12h克以及心肺复苏等多种临床情况,具有高发生率和禁食不禁水,1%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻高死亡率,严重影响患者远期生存率。近来研究醉后,尾静脉注射肝素(100U/kg);手术过程中适显示,瘦素(Leptin)参与了多种急慢性肺损伤的发量追加戊巴比妥钠

6、,每次5mg。仰卧位固定,气管展过程,对呼吸系统具有重要的免疫调节作用。该切开后插管,接动物呼吸机行机械通气(吸人室内实验通过建立大鼠肺缺血再灌注损伤模型,探讨外空气,呼吸频率60~/min,潮气量单侧肺通气8~源性Leptin对肺缺血一再灌注损伤的影响及其作用10ml/kg,双侧肺通气l5—20mlfkg,吸呼比为1:2)。沿胸骨左缘切断第3、4、5肋骨进胸。显露2o13—12—20接收基金项目:安徽省教育厅高校省级自然科学研究项目(编号:肺门,游离左肺动脉、左主支气管和左肺静脉。在肺KJ2012Z161)充气状态下以

7、无损伤微血管夹依次阻断左肺动脉、作者单位:上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科,上海左主支气管和左肺静脉。阻断1h后去血管夹,依200025次开放左肺动脉、左主支气管和左肺静脉,再灌注2安徽医科大学第二附属医院心胸外科,合肥230601h后切除左肺。假手术组:无缺血过程,余同缺血再安徽医科大学第一附属医院心脏外科,合肥230022灌注组。Leptin预处理组:参照有关文献使用剂安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥23oo32量,取Leptin20kg溶解于0.5ml盐水于大鼠制作者简介:龚文辉,男,博士研究生,

8、主治医师;模术前6h行腹腔注射,余同缺血再灌注组。赵强,男,教授,主任医师,博士生导师,责任作者,1.4指标测量E-mailzql16O7@rjh.eom.cn1.4.1血清CRP、TNF.、NF.KB浓度取血清样安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(

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