kai1-cd82、e

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1、KAI1/CD82、E【关键词】KAI1/CD82；E　　摘要：目的探讨KAI1/CD82、ECadherin在宫颈鳞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法分别检测KAI1/CD82、ECadherin在10例正常宫颈组织、15例不典型增生宫颈组织及64例宫颈鳞癌中的表达，分析其表达结果与临床病理特征的关系。结果随着从正常宫颈组织→宫颈不典型增生组织→宫颈鳞癌的转化，二者的阳性表达率呈递减趋势。在宫颈鳞癌中的表达率明显低于正常组织和不典型增生组织(P<0.05)，而正常组织与宫颈不典型增生组织之间无显著性差

2、异(P>0.05)。二者在宫颈组织中的表达呈正相关，且二者在宫颈鳞癌中的共表达下调与淋巴结转移明显相关。结论KAI1/CD82可能与膜蛋白ECadherin相互作用抑制宫颈鳞癌的淋巴结转移；ECadherin基因、肿瘤自身的特性以及多种基因相互作用可能在宫颈鳞癌的转移中起着更为关键的作用。　　关键词：KAI1/CD82；ECadherin；宫颈癌；免疫组化；淋巴结转移　　ExpressionandsignificanceofKAI1/CD82andECadherin　inHumansquamouscervica

3、lcarcinoma　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheexpressionandsignificanceofKAI1/CD82andECadherininhumansquamouscervicalcarcinoma.MethodsTheexpressionsofKAI1/CD82andECadherininedrespectivelybyimmunohistochemicalSPmethodin10casesofnormalcervicaltissue,15casesofatyp

4、icalhyperplasiaofcervicalepitheliaand64casesofsquamouscervicalcarcinoma.4SF)成员。TM4SF分子可与整和素形成复合体，调节整和素的粘附功能，并影响整和素介导的细胞转移。该家族大部分成员为白细胞表面蛋白，参与调节细胞的黏附、迁移、生长及分化。KAI1/CD82可能与膜蛋白ECadherin相互作用抑制原发肿瘤的侵袭、浸润。本研究采用免疫组化SP法分别检测KAI1/CD82、ECadherin在宫颈鳞癌中的表达，并进一步分析其表达与临床病理特征的

5、关系。　　1材料与方法　　1.1一般资料10例正常宫颈组织、15例不典型增生宫颈组织及64例宫颈鳞癌组织来自西安市第四医院病理科1999年2月至2004年4月的手术或活检标本。64例宫颈鳞癌中，20例为宫颈原位癌，44例为宫颈浸润癌(FIGO分期Ⅰ期16例，Ⅱ期28例)，有淋巴结转移者15例，占34.1%。年龄分布27-67岁，平均(45.8±9.1)岁，中位数45.0岁。组织学分级Ⅰ级21例，Ⅱ级27例，Ⅲ级16例。所有病例取标本前均未行放疗、化疗，临床资料完整。　　1.2主要试剂和实验方法浓缩型鼠抗人KAI1/C

6、D82单克隆抗体购自USANEOMARKERS公司，即用型鼠抗人ECadherin单克隆抗体、SP法免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。　　1.3实验方法实验操作按试剂盒说明书进行。组织切片脱蜡至水，PBS振洗3×3min；→组织抗原修复法，PBS振洗3×3min；→滴加50μL内源性过氧化物酶阻断剂，室温下孵育10min。PBS振洗3×3min→滴加50μL正常山羊封闭液，37℃孵育20min，甩去多余液体；→滴加50μL的第一抗体，4℃过夜，PBS振洗3×5min；→滴加50μL生物素标

7、记的第二抗体，37℃孵育30min，PBS振洗3×5min；→滴加新鲜配制的DAB＋H2O2溶液，显微镜下观察3-10min；→自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返兰；→梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。以PBS代替一抗作为阴性对照。用已知的阳性片作为阳性对照。　　1.4结果判定采用半定量积分法[1]，阳性信号为棕黄色。KAI1/CD82、ECadherin染色主要分布于细胞膜。在400倍视野下，每张切片随机选取5个不同的视野，分别记录每个视野的阳性细胞数量并计算其算术平均值，阳性细胞百分数计分：0-5%计

8、0分，5%-25%计1分，26%-50%计2分，51%-75%计3分，>75%计4分。同时观察每个视野阳性细胞的着色深浅并计分：阴性细胞为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；然后根据二者得分相加判断阳性等级：0-1分为阴性；2-3分为弱阳性(+)；4-5分为中等阳性()；6-7分为强阳性()。　　1.5统计学处理采用SPSS1