正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究

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1、正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究作者：龚卫红韩立炜郑海云赵希贤【摘要】目的通过正交试验，优选处方的最佳提取工艺。方法采用水提取方式，以水为溶剂进行提取，选择加水倍数，提取时间，提取次数三个因素，每个因素设计三个水平，因素水平见表1，按照正交实验L9(34)表进行试验。分别以总黄酮作为标志性成分，综合考虑，选定最优提取工艺。结果因素相关性RC>RA>RB,药材的加水量(C)为主要因素。提取的最佳工艺条件为加8倍量水，提取时间为h—次。结论优选得到的提取工艺简单、稳定、可行【关键词】正交试验；

2、提取工艺[Abstract]ObjectiveToexperiment，thebestextractionoptiewaterextrraction,muontimeandnhethreelevel,inaccorbleexperiment.mizationpractionmethltiplechoiumberoftheelsofdesigdancewithtescriptionod,waterascewithwatethreefacton，factorleheorthogon•MethodsThso

3、lventextr,extract!rs,eachoftvelsinTablalL9(34)TaRespectively,a.sasymbolofthecompositionoftotaIflavonoids,consideringtheselectedoptimatedtoRORAmainoptimutheamountonclusionTh>RB,herbsamextractiofwater,exteoptimizedmountofwatnconditionractiontimextractione

4、r(C)asthesfor8timeseh,once.Coprocessissimple,stableandfeasible.[keywords]Orthogonal;extraction骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症［1］。其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水提取和醇提取，提取的活性成分含量相差不多［2］。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果较好［3］，淫羊藿，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效；黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿重要的

5、活性成分。可用水提或乙醇提取［4］。怀牛膝，具有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮，皂苷，多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效，多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲，行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止痛之功效。为了保证制剂质量，用正交设计法研宄其最佳提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮得率的影响，优选出最佳提取条件。1仪器和材料仪器uV-2800H型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）。材料所有药材均购于北京本草方源药业有限公

6、司。2方法和结果样品的制备按处方投料，加规定量的水，煎煮规定的时间和次数滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作为样品，进行测定。正交试验设计选用L9（34）正交试验，结合影响该药材提取效率的主要因素，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响，同时考虑生产实际，选取3个水平，见表1。总黄酮含量的测定方法对照品溶液制备精密称取芦丁（批号100080-XX07，购于中国药品生物制品鉴定所）mg，加甲醇溶解并定容至100mL，即得mg/mL0标准曲线的制备吸取芦丁标准溶液：0、、、、、

7、、mL于1OmL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求得回归方程Y=+R2=,计算试样中总黄酮含量。供试品溶液的制备称取一定量的试样（大约g），加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液mL，于蒸发皿中，加lg聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mLo此液于波长360nm测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。3结果见表2。4结果分析影响因素大小顺序为C>A>B,即提取为最重要，其次为含醇量。5讨论①中

8、药复方常含多种药材，若以某个药材的成分为标准考察提取工艺则不能反映全面，故多选用总成分做标准但单一成分也不能全面反映，建议选取几种总成分综合评定。②实验室正交设计研究时与生产存在差别，一般实验室提取更完全，出膏率高，有效成分含量略高；生产应根据情况进行调整。参考文献[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].—部.北京:化学工业出版.2(X)0.[2]张琳，杨中林.水提法与醇提法对骨碎补中总黄酮含量的影响比较[J].江苏药学与临床研究，XX，12卷