线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中作用

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1、线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中作用【摘要】目的探讨线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法72只SD大鼠随机（随机数字法）分为2组：（1）阴性对照组18只，腹腔注射无菌生理盐水；（2）脓毒症组，按大肠杆菌内毒素注射后6、12、24h分为3个亚组，各18只。取心脏组织，光镜和电镜下观察组织病理学和超微结构的变化，TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数，免疫印迹法检测核转录因子-kB（NF-kB）p65的表迗，黄嘌呤氧化酶法测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD）活性，比色法检测线粒体还原型谷胱甘肽（GPx）活性，硫代巴比妥酸法测定线粒

2、体脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量，OxyBlotTMas蛋白氧化检测试剂盒观察线粒体蛋白氧化。结果脓毒症大鼠心肌有炎症细胞浸润，细胞水肿及空泡形成，并且在24h最明显；心肌细胞凋亡指数和核蛋白NF-kBp65活化均显著增加（P<0.05）。脓毒症大鼠心肌线粒体损伤明显，至24h病变最严重，线粒体膜破碎，线粒体嵴消失，大量空泡形成。脓毒症大鼠心肌线粒体抗氧化酶SOD和GPx活性显著下降（均P<0.05），线粒体脂质过氧化和蛋白氧化均显著增加（均P〈0.05），并呈时间依赖性。结论线粒体损伤在脓毒症心肌细胞凋亡中发挥重要作用，其作用机制可能与线粒体抗氧化物酶活

3、性降低，活性氧产生过多和聚集有关。【关键词】脓毒症；心肌损伤；细胞凋亡；线粒体；核转录因子-kBRoleofdamagedmitochondriainca.rdiocyteyanjing201l@yahoo.com.cn[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheroleofdamagedmitochondriaincardiaccellapoptosisinapoptosisinsepticratsChang-qin，GONGShi-jin，CAIGuo-long,CHENJin，XUnit,ZhejiangHospital，Cor

4、respondingauthorLILi,YANJing，CHENDAIHai-wen,YUYi-hua，Qiang-hong.IntensiveCareHangzhou310013，China:YANJing,Email:septicratsandthepossiblemechanisminvolved.MethodsSeventy-twoSprague-Dawleyratswererandomly(randomnumber)dividedintonegativecontrolgroup(n=18)andsepticgroup(furtherdividedi

5、ntothreegroupsasperratssacrificed6h，12h，and24hafterendotoxininjectionintra-peritoneally，n=18).Theheartsofratsweretaken.Thechangesofcardiacmorphologywereobservedunderlightmicroscopeandscanningelectronmicroscope.Cellapoptosisinsituwereexaminedbyusingterminaltransferase-mediateddUTPnic

6、kend-labelingassayandnuclearfactor-kappa.B(NF-kB)activationinmyocardiumwasdetectedbyusingWesternblottingtoestimatemyocardialcellapoptosis.Mitochondriallipidandproteinoxidationweremeasuredtoassessoxidativestress，andmitochondrialsuperoxidedismutase(SOD)andglutathioneperoxidase(GPx)act

7、ivitiesweredeterminedtoestimateantioxidantdefense.ResultsSepticinducedinflammatorycellsinfiltration，myocardiumdegenerationandeffusioninatime-dependentmanner.Aremarkableexpansionofcapillariescouldbeobservedintheheartsofinfectedratsatpost-challengeof24h.Comparedwithsham-treatedrats，th

8、epercentageofapopto