显色培养基和传统ss培养基对沙门菌检测效果的探析

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1、显色培养基和传统SS培养基对沙门菌检测效果的探析王丽倩史亚张春萍刘秀婷程东庆(通讯作者)(浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053)【摘要】目的比较显色培养基和SS培养基检测水中沙门菌的效果,为快速而准确检测自来水管水样中沙门菌的分离鉴定提供实验基础。方法将7个水样稀释10倍、100倍后,分别涂布于沙门显色培养基平板和SS平板,37°C培养48h后采用传统的形态学方法对细菌进行初步分类并计数,对培养基中可疑菌落分离纯化后氧化酶试验和葡萄糖氧化-发酵试验(O/F试验),凡氧化酶试验阴性,葡萄糖O-F试验为发酵型者即为可疑菌,采用肠杆科细菌牛.化鉴定

2、系统,数码鉴定37°C48h后观察结果。结果共检测7份水样,2-7号(即除了1号样)的沙门氏菌显色培养基中沙门菌菌落总数均大于SS培养基检测出的沙门菌菌落总数:其中2号样、3号样、7号样的沙门氏菌显色培养基和SS培养基的沙门菌菌落总数<1.0×10CFU/mL。结论采用显色培养基分离沙门菌较易鉴别且直观,同时也可以克服因肉眼挑选带来的主观误差。木次试验显色培养基对沙门菌菌落数的检出率高于SS选择性培养基,说明显色培养基适于水样标木中沙门菌的检测。【关键词】显色培养基SS培养基沙门菌【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-

3、1752(2014)18-0070-02沙门氐菌(salmonella)是肠杆菌科中一种重要的人畜井患病原菌,是细菌性食物中毒的重要致病菌[1,2]。据世界卫生组织的报告,1985年以来,在世界范围内,由沙门氏菌引起的已确诊的人类患病人数显著增加,在一些欧洲国家已增加五倍以上。对于我国情况来说,尤其是内陆地区,由沙门氏菌引起的食物中毒屡居首位[3]。因此如何准确地检测该致病菌是有效提高临床治疗效率、确保食品安全的重要前提。自来水是指通过处理厂浄化、消毒后生产出来的符合相应标准的供人们生活、生产使用的水。我国饮水卫生标准(GB5749-85)规定每毫升水

4、样细菌总数37°C,培养24h不得大于100个[4】。然而,自来水管垢中,尤其是长久不用的自来水管中含有各种病原微生物,包括沙门菌,志贺菌等,饮用富含致病菌的水存在安全隐患。因此,对沙门菌的快速鉴定尤苏是对自来水管垢中水样中沙门菌的鉴定,对人们的生产生活具有十分重要的应用价值。0前国内沙门菌检测仍以常规分离培养、生化鉴定为主,而生化鉴定的前提就是在选择性平板上挑取可疑单菌落。为评估显色培养基的检测效果,我实验室采用显色培养基和传统培养基平行检测水样中的沙门菌。现将两种方法检测效果对比报告如下,望能为显色培养基的广泛应用提供参考依据。1材料与方法1.1样

5、品用无菌玻璃容器收集7份不同自来水管垢中水样,记录样品来源、体积、取样吋的温度。在冷藏5°C&plUSmn;3°C、避免光照条件下将样品及时运送至实验室。1.2实验主要仪器智能人工气候箱(PRX-250A,宁波海曙赛福实验仪器厂);电子精密天平(ARA520,OhausCorp);全自动立式电热压力蒸汽火菌锅(YXQ-LS-SII,上海博迅实验有限公司医疗设备厂);微波炉(EM-2012MS1,合肥荣事达III洋电器股份有限公司);4°C冰箱(BCD-205E/Y,海尔集团);生物安全柜(A2,赛默飞世尔科技中国有限公司)。1.3实验主要试剂沙门氏菌显

6、色培养基(青岛高科技工业园海博生物技术奋限公司),SS培养基(杭州天和微生物试剂冇限公司),肠杆菌科生化鉴定试剂(杭州天和微生物试剂有限公司)。1.4方法将7个水样稀释10倍、100倍后,分别涂布于沙门显色培养基平板和SS平板,37°C培养48h后采用传统的形态学方法对细菌进行初步分类并计数,对培奍基中可疑菌落分离纯化后氧化酶试验和葡萄糖氧化-发酵试验(0/F试验),凡氧化酶试验阴性,葡萄糖0-F试验为发酵型者进一步采用肠杆科细菌生化鉴定系统,数码鉴定37°C48h后观察结果。2结果2.1SS培养基鉴定结果在2天的培养期间,每天观察菌落的生长情况,采用

7、传统的形态学方法对细菌进行初步分类并计数。2天后,沙门氏菌呈无色透明菌落,表面光滑,直径lcm左右,冇或无黑色中心,见图1。在SS平板上鉴定出1号样的菌落总数是2×105CFU/mL;2号样、3号样、7号样的菌落总数都是为<1.0×10CFU/mL;4号样SS培养基检测沙门菌菌落总数是3.3×102CFU/mL;5号样SS培养基检测出菌落总数是4×102CFU/mL。各样品可疑菌鉴定菌落总数结果见表1。对SS培养基中可疑菌落分离纯化后氧化酶试验和葡萄糖氧化-发酵试验(0/F试验),凡氧化酶试验阴性,

8、葡萄糖0-F试验为发酵型者即为可疑菌,采用肠杆科细菌生化鉴定系统,数码鉴定37°C48h后观察

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