沙门氏菌显色培养基快速检测与分离应用.doc

沙门氏菌显色培养基快速检测与分离应用.doc

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1、编号:CRM004沙门氏菌显色培养基用途:用于沙门氏菌的快速分离和鉴定。沙门氏菌属是一大群寄生于人类和动物肠道内,生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌,有的专对人类致病,有的只对动物致病,也有对人和动物都致病,这些统称为沙门氏菌。沙门氏菌冃前已经发现1800种以上,按抗原成分可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌型。其中与人类疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌,乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌,丁组的伤寒和肠炎杆菌。此菌可引起禽伤寒、鸡白痢、猪霍乱、鼠伤寒沙门氏菌病、猪副伤寒、马流产沙门氏菌病等疾病

2、。致病性最强的是猪霍乱沙门氏菌,其次是鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌。感染沙门氏菌或食用被带菌者粪便污染的食品,可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。图鉴:原理:蛋白腺和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;抑菌剂抑制革兰氏阳性菌,增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对丿应的酶发生特异性反丿应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落,大肠菌群产生蓝绿色的菌落。培养基配方(每升):蛋白

3、月东19.6g酵母膏粉3g氯化钠5g抑菌剂l・5g琼脂12g混合色素6.4g最终pH7.0±0.2使用方法:1、称取木培养基47.5g,用1000ml蒸惚水或纯水溶解,混合均匀加热至100°C,并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),不需高压灭菌,冷至50°C,倾注灭菌平皿。2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。3、建议使用二步增菌法:(1)前增菌:将处理过的样iPi25g置于225mL缓冲蛋白陈水屮,混合均匀后37°C培养6〜8h;(2)选择性增菌:取前增菌液ImL加

4、入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中,混合均匀后37°C培养18〜24h;4、用接种环取增菌液一环,划线接种丁沙门氏菌显色平板上,置T36±1°C培养18-24小时。5、观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1°C培养18—24h生长情况如卜表。菌名菌号生长状况培养特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115良好菌落品

5、红色大肠埃希氏菌ATCC25922良好菌落蓝绿色奇异变形杆菌CMCC(B)49005良好菌落无色粪肠球菌ATCC29212受抑制—贮存:贮存丁避光、阴凉干慄处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规格:可配置1L的培养基干粉。

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