leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞mmp

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1、Leptin对小鼠窗口期子宫内膜上皮细胞MMP郝翠芳，刘萍，沈肖方，张宁，王昕荣【摘要】目的研究瘦素(Leptin)对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌金属蛋白酶-9(MMP-9)及细胞粘附分子-1(ICAM-1)的影响。方法离体培养着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞，用不同浓度Leptin干预，通过免疫组织化学SP法对子宫内膜上皮细胞MMP-9、ICAM-1蛋白的表达进行检测。结果(1)随着Leptin浓度的增加，原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性升高(P0.01)。(2)随着Leptin浓度的增加,原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌ICA

2、M-1表达量呈浓度依赖性升高(P0.01)。当浓度增加到一定水平ICAM-1的表达不再升高(P>0.01)。结论一定水平的Leptin可以促进子宫内膜上皮细胞MMP-9及ICAM-1的分泌，有利于胚胎着床。【关键词】瘦素;子宫内膜上皮细胞;免疫组化;金属蛋白酶-9;细胞粘附分子-1;小鼠[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofLeptinonmatrixmetalloproteinases-9(MMP-9)andintercellularadhesionmolecule-1(ICAM-1)secretedf

3、romendometrialepithelialcellsduringembryoimplantationice.MethodsEndometrialepithelialcellsfrommiceintheembryoimplantationstageetrialepithelialcellsmunohistochemicalmethodetrialepithelialcells.ResultsMP-9secretedfromtheendometrialepithelialcellsfertilizedinvitroandtheamountofICAM-1s

4、ecretedfromtheendometrialepithelialcellsfertilizedinvitroincreasedinadose-dependentmanner(P0.01).ConclusionItcanbeconcludedthatLeptinuptoacertainlevelcanincreasetheexpressionofMMP-9andICAM-1secretedfromendometrialepithelialcellinmice,thusimprovingembryoimplantation.　　[Keyetrialepit

5、helialcells;immunohistochemicalmethod;MMP-9;ICAM-1;mice　　近年的研究表明，多种细胞因子和激素在胚胎生长发育及妊娠母体中起着不可低估的调控作用。其中，瘦素(Leptin)是近年发现的Ⅰ型细胞因子，是肥胖基因的产物，由白色脂肪细胞分泌的一种含146个氨基酸的蛋白质。Margetic等[1]报道Leptin通过调节下丘脑-垂体-性腺的功能影响性激素的合成和分泌，也可通过直接或间接的外周作用对生殖系统功能产生影响，抑或通过直接结合卵泡细胞膜表面瘦素受体影响细胞的功能，但其具体机制尚不明了。本研究拟通过免疫组化方

6、法检测围着床期小鼠子宫内膜上皮细胞在不同浓度Leptin作用下MMP-9、ICAM-1的表达量，以探讨Leptin在胚胎着床过程中的可能调控作用。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1实验动物　　成年昆明种雌性小白鼠，6～8周龄，体重25～30g。雄性3～4月龄，体重40～50g。由烟台绿叶生物制药公司实验动物中心提供[许可证号：SCXK(鲁)20030008]。实验动物房光、暗周期均为12h，饲养温度为24℃～26℃，喂普通小鼠饲料，自由摄食饮水。　　1.1.2试剂　　DMEM/F12培养基(Hyclone，美国);胎牛血清(FBS)(Gibco，美

7、国);双抗(Hyclone，美国);孕马血清促性腺激素(PMSG)(宁波第二激素厂);人绒毛膜促性腺激素(HCG)(烟台北方制药厂);鼠重组瘦素(Leptin)(Sigma，美国);MMP-9、ICAM-1兔抗鼠单克隆抗体(武汉博士德);SP免疫组化试剂盒(北京中杉金桥);DAB试剂盒(Invitrogen，美国)。　　1.2方法　　1.2.1小鼠子宫内膜细胞的原代培养与鉴定　　取成年雌性昆明种小白鼠，体重25～30g，4～5pm腹腔注射PMSG10IU，48h后腹腔再注射HCG10IU。雌雄按2:1合笼,自然交配,次晨查见阴栓者定为妊娠第一天。取妊娠第四天

8、雌鼠脱颈处死，按照石运芝[2]报道的方法培养上皮细胞