探讨中药肝复健冲剂对大鼠肝纤维化形成的影响

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1、探讨中药肝复健冲剂对大鼠肝纤维化形成的影响【胶原  InfluenceofGanfujiangranuleformulaonprocessofliverfibrosisinrat  【AbstractAIM:Toinvestigatetheeffectofganfujiangranuleoncollagensedimentinrathepaticfibrosisinducedbydiethylnitrosamine(DEN).METHODS:DENinducedlivefibrosismodelinistratedasinterventionmeas

2、ure.Influence(EFJgroup)ofganfujiangranuleoncollagensedimentandhepatocyteproliferationinedbyPicricacidSirusredstainingandimmunohistochemicalstaingmethods,andanalyzedbyputerimageanalysistechnique.RESULTS:Collagensedimentinratliverincreasedgraduallyodel.Inflammatorydamageandthedeg

3、reeoflivercirrhosisodelgroup.Collagensedimentinliverandpositiveexpressionofproliferotivecellnumberontgen(PA)inhepatocytesent:4entinratliverandmaypreventlivercirrhosistransittohepatocarcinomainsomedegreebyinhibitoverproliferatingofhepatocytes.  【Keyedicine;livercirrhosis;collage

4、n  【目的:观测中药肝复健冲剂对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝纤维化形成的影响.方法:建立DEN诱导大鼠肝硬化模型,同时给予肝复健冲剂进行干预,应用天狼红苦味酸特染法、免疫组化染色法及计算机图像分析技术检测中药对DEN致大鼠肝纤维化过程胶原沉淀及肝细胞增殖特性的影响.结果:随着模型大鼠肝纤维化程度加重,肝内胶原沉积量亦呈逐渐增加趋向.中药组大鼠肝脏炎性损害及肝纤维化程度均较同期模型组大鼠轻,胶原沉积量及细胞增殖核抗原(PA)阳性着色肝细胞数明显减少,两组间差异有统计学意义,P%26lt;0.05[胶原沉积量:4wk(15.20±2.21)vs(7

5、.19±0.97);12wk(27.1±4.6)vs(16.0±1.7).阳性表达PA肝细胞数:12wk(21.1±0.32)vs(6.4±0.2);16wk(31.1±7.1)vs(10.1±0.8)].结论:中药肝复健冲剂可通过减少肝内胶原沉积及可能恶性增殖的肝细胞,抑制和延缓实验性动物肝纤维化的形成,并一定程度上预防肝硬化向肝癌的转变.  【肝复健冲剂;肝硬化;胶原  0引言  HBV感染患者和几乎全部HCV携带者有可能发展为肝硬化,亦是造成肝硬化发病率居高不下的主要原因,而肝硬化中约30%患者可并发肝癌[1].AFP升高、肝硬化伴细胞不典型增

6、生或细胞增殖活性增高成为肝癌发病的高危因素[2],因而慢性肝病、肝硬化的防治十分重要.如何延缓肝纤维化形成进程或逆转至正常,已成为肝硬化及肝癌防治的中心新题目.因此,研制有效且可长期服用的预防制剂也越来越引起人们的关注.健脾扶正法是中医临床防治肝硬化和肝癌常用的方法之一[3].本科室根据中医基础理论及临床实践研制的以健脾益气立法,由淮山药、山楂、大枣等药食同源中药组成的肝复健冲剂,在临床肝硬化防治过程中取得较好疗效.  1材料和方法  1.1材料SD雄性大鼠,体质量150~180g,由第四军医大学实验动物中心提供.二乙基亚硝胺(DEN)购自Sigma

7、公司.天狼红(解放军第475医院赠予).PA检测试剂盒购自DAKO公司.中药饲料:肝复健冲剂按30.4g%26#12539;kg-1均匀混合于基础饲料中压制而成(第四军医大学实验动物中心提供).  1.2方法  1.2.1模型建立大鼠适应环境3d随机分为模型组(Model)及中药组(Ganfujian,GFJ),每组各30只,分别以0.1g%26#12539;L-1DEN自由饮水,同时分别给予基础饲料或含中药的饲料喂养.16.常规HE染色、切片胶原非凡染色及免疫组化染色.  1.2.2切片胶原染色按天狼红饱和苦味酸法[4].普通石蜡切片,厚4μm;常

8、规脱蜡至水,0.1mol%26#12539;L-1天狼红饱和苦味酸,避光室温孵育20min;不洗,950mL

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