中药肝复健纤维影响论文

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1、中药肝复健纤维影响论文引言HBV感染患者和几乎全部HcV携带者有可能发展为肝硬化，亦是造成肝硬化发病率居高不下的主要原因，而肝硬化中约30%患者可并发肝癌［1］.AFP升高、肝硬化伴细胞不典型增生或细胞增殖活性增高成为肝癌发病的高危因素［2］，因而慢性肝病、肝硬化的防治十分重要代写论文.如何延缓肝纤维化形成进程或逆转至正常，已成为肝硬化及肝癌防治的中心问题.因此，研制有效且可长期服用的预防制剂也越来越引起人们的关注.健脾扶正法是中医临床防治肝体硬化与肝癌常用的方法之一［3］.本科帖室根据中医基础理论及临床实践研制的以鹛健脾益气立法，由淮山药、山楂

2、、大枣等节药食同源中药组成的肝复健冲剂，在临床赧肝硬化防治过程中取得较好疗效.1材壮料和方法1.1材料SD雄性大鼠，体诞质量150~180g，由第四军医大学实验动物中心提供.二乙基亚硝胺购自S葩igma公司.天狼红（解放军第475馊医院赠送）.PcNA检测试剂盒购自DＩAko公司.中药饲料：肝复健冲剂按3岬0.4g#12539;kg-1均匀混芗合于基础饲料中压制而成（第四军医大学实验动物中心提供）.1.2方法1棣.2.1模型建立大鼠适应环境3d随机分为模型组（model）及中药组，每汕组各30只，分别以0.1g#1253绍9;L-1DEN自

3、由饮水，同时分别给闸予基础饲料或含中药的饲料喂养.16wk时停用DEN饮水及中药饲料.考虑到渠造模过程大鼠有一定死亡率，分别于建模黛开始后每4wk两组各处死5只大鼠，剩余大鼠留继续观察.取肝组织固定于10沱0g#12539;L-1甲醛溶液，石蜡包埋，切片厚4μm.常规HE染色、п切片胶原特殊染色及免疫组化染色.1睇.2.2切片胶原染色按天狼红饱和苦味玩酸法［4］.普通石蜡切片,厚4μm;≡常规脱蜡至水,0.1mol#1253右9;L-1天狼红饱和苦味酸,避光室温毛孵育20min;不洗,950mL#1酷2539;L-1乙醇脱水,二甲苯透明爝,

4、封片.1.2.3PcNA免疫组织窗化学染色取材肝组织固定于100mL#骒12539;L-1缓冲甲醛溶液24h诘，常规石蜡包埋，切4μm厚切片，二甲旯苯、梯度乙醇脱蜡至水；染色方法为免疫裢ABc法.以0.1mol#12539踱;L-1PBS取代一抗作阴性对照，以贪正常大鼠肝组织作正常对照.1.2.豫4染色结果判定及计算机图像分析肝脏背渥景为淡黄色，胶原阳性着色呈红色,采用ヘHPIAS1000高清晰度彩色病理图将文分析系统,随机选择5个汇管区进行染─色胶原的定量分析,取其均值.PcNA煳阳性着色为覆盖胞核的棕黄色颗粒.用网荮格（10×10）测试法计数

5、阳性肝细胞■.切片各选择10个按同一方向移行、不ㄛ重叠的高倍镜视野（×40），记数阳性襞及阴性细胞数（100个细胞）.统计禧学处理：采用SPSS统计分析软件对所л获得的数据进行组间秩和检验.2结果祁2.1大鼠肝纤维化过程组织形态学变鲕化模型组大鼠使用DEN4~8wk时肝表面由平滑逐渐变为粗糙，可见小颗粒，捉呈局灶性.光镜下肝细胞肿胀，空泡变性伺，局灶性坏死，伴炎细胞浸润，并逐渐出瞿现纤维组织增生.12wk时40%大鼠礻已出现明显肝硬化，肝表面更加粗糙，肝脏增大、肿胀，色暗或淡.16wk时大鸱鼠均有肝硬化表现，结节增多变大，肝脏蔗缩小，组织学有

6、大量形态不一，大小排列煊不齐的假小叶形成.部分大鼠肝脏已出现早期癌结节，镜下可见少量癌细胞增生.胂中药组大鼠各时期肝脏损害均较单纯诱导入组轻，12wk无肝硬化大鼠，16wk免50%大鼠出现肝硬化，但未发现癌变.胙2.2大鼠肝纤维化过程肝内胶原沉积饮变化模型组大鼠4wk肝内即出现少量红胜色胶原阳性染色，多集中于汇管区.随着ミ肝内病变加重，假小叶的形成，肝脏沉积侪的胶原逐渐增多，16wk病变以结节性粑肝硬化为主，切片胶原沉积量亦达到顶峰躞.中药组大鼠肝内病变较模型组明显减轻ト，肝硬化发生晚，肝内胶原沉积量少，在窳4wk及12wk两组间差异有统计学意

7、贰义.表1两组大鼠肝脏胶原沉积的比较2.3大鼠肝纤维化过程肝细胞阳性表达PcNA情况在模型初期即可见少量肝细滤胞PcNA阳性着色，随着模型进展，大帑鼠肝脏PcNA阳性表达的肝细胞数目逐执渐增加，并在12～16wk呈明显攀升荧趋势.中药组大鼠PcNA阳性的肝细胞轧数在各期均低于模型组，其中12～16乔wk差异显著.表2大鼠肝细胞阳性表幂达PcNA的比较3讨论肝纤维化是黍许多慢性肝病重要的中间环节，是由于肝内纤维生成与降解失衡，致使过多的胶原祟在肝内沉积，常伴于炎症并可发展为肝硬化.肝纤维化形成作为肝硬化发展过程中蚰的一个重要现象，与肝硬变的发

8、展是平行Ⅵ的［5］,因此肝纤维化程度的精确了解是慢性肝病研究不可少的.然而常用的血￥清学指标和组织学纤维化分级标准却难以逦直接、准确反