丁苯酞对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子影响的研究

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1、丁苯酞对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子影响的研宄1.华北石油总医院神经内科河北任丘062552;2.湖北医药学院第四临床学院湖北十堰442000；3.渤海石油职业学院河北任丘062552【摘要】观察应用丁苯酞治疗对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)浓度的变化的影响，并与非丁苯酞治疗的脑梗死患者及正常健康人比较，以期发现血管N皮生长因子在脑梗死患者血液屮的变化规律，及丁苯酞对血管内皮生长因子浓度、脑梗死的临床疗效的影响，探索其临床用药的安全性和有效性，揭示丁苯酞改善脑循环的机制，从而完善丁苯酞的药理作用。【关键词】丁苯酞；脑梗死；血管内皮生长因子；疗效；NIH

2、SS评分血管内皮生长因子又称血管调理素，是一种内皮细胞特异性有丝分裂原,具有促进内皮细胞增生、转移，增加血管通透性和促进血管生成的作用。丁苯酞是我国具有自主知识产权的一类新药，临床主要用于缺血性脑血管病的治疗，研究表明丁苯酞与传统的抗缺血药物不同在于其作用靶点比较广泛，可作用于多个环节，目前发现丁苯酞具有：①保护线粒体，改善脑缺血组织的能量代谢。②抑制细胞A乳酸脱氢酶的释放，保护神经细胞，降低细胞死亡率。③改善脑循环和脑血流。④抑制细胞内钙离子超载。⑤抗缺血后炎症反应。⑥抗氧由基产生。⑦保护血脑屏障。⑧降低热休克蛋白(HSP)70mRNA及c-fos的表达。⑨抑制神经细胞凋

3、亡等作用。本研究目的是观察应用丁苯酞治疗脑梗死患者血清血管A皮生长因子浓度的变化，并与常规治疗的脑梗死患者及正常健康人作对照，比较其血清血管内皮生长因子浓度的变化，以及脑梗死后不同时间点血淸血管内皮生长因子浓度的变化，以期发现血管内皮生长因子在脑梗死患者血液屮的变化规律，及丁苯酞治疗对血管内皮生长因子变化的影响，揭示丁苯酞改善脑循环的机制，完善丁苯酞的药理作用，并观察丁苯酞治疗脑梗死的临床疗效及安全性。一、研宄过程（一）研究方法100例急性脑梗死患者，按入院顺序随机以1:1比例分为治疗组和对照组，中途不能完成实验的剔除，后面进行补充以保证实验人数。对照组50例男性28例，女

4、性22例，年龄55〜78岁，平均59.04±6.88岁，大梗死灶10例，中梗死灶23例，小梗死灶17例。常规给予抗凝、抗血小板、保护脑细胞、活血化瘀及对症治疗14天。治疗组50例，男性30例，女性20例，年龄47〜79岁，平均58.5±6.25岁，大梗死灶12例，中梗死灶19例，小梗死灶19例。在对照组治疗基础上加用丁苯酞软胶囊0.2g/次，3/d，治疗14天。正常健康对照组30例，男性19例，女性11例，年龄48〜67岁，平均57.87±5.15岁。各组年龄、性别分布经齐M性检验后差别无显著性差异（P>0.05）,治疗组和对照组在

5、发病吋间、病灶部位、体积，神经功能评分及伴随疾病等方面检验无显著性差异（P〉0.05），具右可比性。（二）标本的采集及处理：全部受试者均于清晨空腹采静脉血6ml,纳入研究的急性脑梗死组患者均于24小吋内、3天、7天、14天各抽静脉血6ml，血标本在室温下静置30分钟，3000转离心20分钟，收集血清，分装后于-4CTC冰箱保存备检。1.检测方法：采用双抗体夹心ELISA法进行检测。2.所用仪器和试剂盒：Thermo全自动酶标仪，芬兰生产；MULTISKANMK3型洗板机，芬兰生产；-40°C冰箱，海尔公司生产；恒温水浴箱，北京光明医疗仪器厂生产；JingliLD4-1.8高

6、速离心机，北京生产；AE-200精密分析天平，瑞士产；全自动紫外分光光度计，美国PerkonElmer公司；高精度移液器，日本Nichoryo立详；血管内皮生长因子试剂盒，北京晶美试剂公司。3.操作步骤（严格按照说明书进行操作）：1）从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放冋4°C冰箱保存。2）标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设5个标准品孔，第一孔中加标准品100μl,再加标准品稀释液50μl,混匀；自第一孔中取100μl液体加到第二孔，然后在第二孔加标准品稀释液50μl，混匀；在第二孔中先取50μl弃掉，然后取5

7、0μl加到第三孔中,取标准品稀释液50ul加入第三孔中，混匀；从第三孔中取50μl液体加到第四孔中，然后在第四孔中加标准品稀释液50μl,混匀后从第四孔中取50μl液体加到第五孔，然后在第五孔中加标准品稀释液50μl,混匀后从第五孔中取50μl弃掉。稀释后各孔加样量均为50μl,浓度分别为（480pg/mL,320pg/mL,160pg/mL,80pg/mL,40pg/mL）。3）加样：分别设空白孔、待测样品孔，后者先加样品稀释液40μl，之后再加待测样品10μ