大鼠脑中清脑宣窍方栀子苷等3个指标性成分的高效液相色谱分析.doc

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1、大鼠脑中清脑宣窍方栀子苷等3个指标性成分的高效液相色谱分析【摘要】目的建立大鼠脑中清脑宣窍方有效部位中3个指标性成分梔子苷、人参皂苷Rgl、Rbl的HPLC浓度测定方法。方法大鼠脑样品取出，洗去残血、匀浆、甲醇提取、离心后水溶，用C18固相萃取柱处理，以亥茅酚苷为内标，选用色谱柱：AgilentEclipseXDB-C18(mmX250mm，5pm)，EclipseXDB-C18保护柱。流动相为乙腈-甲酸水二元梯度洗脱，柱温为30°C,流速为ml/min,检测波长为203nm。结果各成分的最低检测限(S/N〉3)在〜mg/L之间，平均回收率均在90%以上

2、，日内、日间精密度及稳定性的RSD均小于10%。结论该方法简便、准确，可用于脑组织中清脑宣窍方有效部位梔子苷、人参皂苷Rgl、Rbl3种成分定量分析。【关键词】清脑宣窍方;振子苷；人参皂苷Rgl;人参皂苷Rbl;高效液相色谱QuantitativeDeterminationof3MainComponentsinEffeetiveFractionofQingnaoxuanqiaoFormu1ainSDRatBrainbyRP-HPLCAbstract：ObjecthodfordeterminationsinratbrainsofgeneRglandgins

3、enosideiveToestablishametnoftheconcentratioiposide,ginsenosidRblbyHPLCintheeffectivefractionofQina.MethodsTheratbraout,cleanedremainioplasm,extractedbyywateraftercentrifsolidphasewasusedfSec-o-glucosylhamarnalstandard.TheprutonachromatographlipseXDB~C18chromam)andaprotectivecolum

4、nofEclignaoxuanqiaoFormulinsamplesweretakenngblood,smashedintMeOH,anddissolvedbuging.AcolumnofC18ortheextractionandudolwastakenasinteocedurewascarriedoycolumnofAgilentEctographycolumn(mmX250mm,5upseXDB-C18.Themobilephasewasabinaryghanenitriletoacidwmperaturewas30°C.Thminandthedet

5、ectionwesttestingconcenttuent(S/N>3)wasfroaveragerecoverywasuracyandstabilityi-daywereallbelowlOhodiseasyandaccuranthequantitativeanradientelutionofetaterandthecolumnteeflowratewasl.0ml/wave1engthwas2031orationofeachconstimO.16tol.lmg/L.Theabove90%.RSDsofaccnintra-dayandinter%.Co

6、nclusionThemette,whichcanbeusedialysisof3constituentsintheeffectivefractionofQingnaoxuanqiaoformulainbraintissue.Keywords:QingnaoxuanqiaoFormula；Geniposide；GinsenosideRgl；GinsenosideRbl；HPLC清脑宣窍方为王永炎院士救治脑中风临床经验方，由栀子、三七等中药组成。本方及其有效部位具有清热解毒、宣窍活络的作用，对于缺血性脑中风具有显著的疗效［1，2］。梔子苷，人参皂苷Rgl，

7、Rb1为该方主要药效成分［3,4］。为了解其在体内的分布及代谢情况，本文建立了HPLC同时测定清脑宣窍方有效部位中3种成分在脑组织中的浓度测定方法。1仪器与试药Waters2695高效液相色谱仪，2696DAD检测器，自动进样，SartoriousBT25S型1/100000电子分析天平（北京赛多利斯仪器有限公司），KQ-500DE型超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）；QL-901漩涡混和机（其林贝尔仪器制造公司）；CleanertC18SPE固相萃取柱（3ml，200mg,60um,北京艾杰尔科技有限公司）。梔子苷，人参皂苷Rgl、Rbl对照品（批号

8、分别为：110749-XX09,110703-XX22,110745-XX12）