有关次声对雄性小鼠---细胞dna cpg甲基化水平的影响

有关次声对雄性小鼠---细胞dna cpg甲基化水平的影响

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1、有关次声对雄性小鼠***细胞DNACpG甲基化水平的影响:高柳村,陈彩云,周鹏,陈景藻,舒青【次声;小鼠;***细胞;甲基化【AbstractAIM:ToinvestigatethechangesofgenomeDNAmethylationoftesticularcellsinmiceanceliquidchromatography(HPLC)afterinfrasoundexposure,andtoexploretherelationsbeticeeDNAmethylationoftesticularcellsinthemiceeDNAmethylationoftesticularcelli

2、nexposedgroupsearkedlyaffectsthegenomeDNAmethylationoftesticularcells.Thesechangesarepositivelyassociatede.【Keyice;testiscell;methylation【目的:应用高效液相色谱分析技术对次声功能后小鼠***细胞基因组DNACpG甲基化的变化进行分析,以探究次声功能和表遗传学改变的关系.方法:采用8Hz,130dB的次声分别功能于1,7和14d组3个实验组,各雄性Balb/c小鼠20只,逐日次声暴露2h.同时设对照组,并利用高效液相色谱分析技术对实验组和对照组的小鼠***细胞

3、基因组DNACpG甲基化水平进行检测.结果:次声暴露1,7和14d组的小鼠***细胞基因组DNACpG甲基化程度均低于对照组,并随次声功能时间的变化而改变,分别为0.0150±0.0127vs0.0235±0.0062,0.0140±0.0030vs0.0273±0.0040,0.0150±0.0096vs0.0250±0.0049(P=0.000).结论:次声功能可致***细胞基因组DNACpG甲基化的改变,和次声暴露时间有关.【次声;小鼠;***细胞;甲基化0引言高强度次声可致生物体组织和器官的损伤,可使日常生活和战斗能力受到影响.表遗传学是探究没有DNA序列变化、可遗传的、稳定的基因表达

4、(修饰)的改变.次声是否可致生殖细胞表遗传学变化尚未见报道.本实验我们采用第四军医大学研制的次声压力舱系统,观察在一定声压级水平的次声功能下小鼠***细胞基因组DNACpG甲基化的变化情况,以探究次声的损伤和表遗传学改变的关系,为探索次声对人体的危害及制定预防办法提供一定的依据.1材料和方法1.1仪器设备次声声源及检测系统采用第四军医大学在中国科学院声学探究所和航天产业总公司第41所的指导和协作下建成的、声源为电动扬声器式次声压力舱系统及检测系统.次声压力舱系统由低频信号发生器、功率放大器和电动扬声器组成.检测系统主要包括次声传声器和次声信号数据采集分析系统.1.2实验动物及分组健康雄性Bal

5、b/c小鼠90只(体质量18~20g),我校实验动物中心提供.分笼饲养于舒适舒适的环境下(基础噪音不高于40dB),标准饲料喂养,自由饮水.小鼠随机分为1,7和14d共3组,每组20只,天天暴露于次声压力舱产生的8Hz,130dB声压场中2h;对照组每组10只,按上述3个时间点天天在次声舱内无功能放置2h.1.3***组织DNA提取和鉴定各组于次声功能完毕后当日用脊椎脱臼法正法小鼠.摘取***组织,将1.0g组织放进研钵中磨碎,加DNA提取液10mL(含10mL/LTrisClpH8.0,0.1mol/LEDTA,pH8.0,0.5g/LSDS),蛋白酶K消化,55℃水浴过夜,饱和酚/氯仿法抽

6、取DNA,冰乙醇沉淀DNA,常温晾干,加水溶解,紫外分光光度计检测DNA浓度及纯度.1.4HPLC基因组甲基化检测将100μg基因组DNA和100μL400mL/L的氢氟酸(HF,优级纯,上海致冷剂厂)混匀,80℃温育12h后开盖置40℃烘箱至液相完全蒸发,随之加新鲜配制的0.02mo1/LpH为2.3的NH4H2P04100μL.碱基水解后,采用包括自动紫外监测及积分仪的edTrPromEkol,2001,2:16-20.[5]王冰水,陈景藻,刘斌,等.次声暴露对L929细胞膜影响的原子力显微镜观察[J].中华劳动卫生职业病杂志,2005,23(6):428-430.[6]Choocyste

7、inontheproductionofnitricoxideinendothelialcells[J].ClinExpPharmacolPhysiol,1999,26(10):817-818.[7]幺晓轶,裴兆辉,朱妙章,等.8Hz/90dB次声暴露后心肌细胞凋亡及其相关机制探究[J].第四军医大学学报,2006,27(6):490-492.[8]谭永霞,李玲,陈景藻,等.次声对大鼠海马5HT,5

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