基于毛毕吸虫成虫分离方法的探究初报

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1、基于毛毕吸虫成虫分离方法的探究初报　摘　要　目的　为进步毛毕吸虫成虫的收集率。方法　对家鸭行离体或在体肝静脉逆行灌注收集肝内和门静脉内成虫；同时对家鸭灌注降主动脉，以收集肝内、门静脉内和肠系膜静脉的成虫。结果　应用上述方法可收集到大量活的无损伤的成虫。结论　灌注法优于解剖法，且简便、快捷，实用性强。PRELIMIARYSTUDYONTHEMETHODSOFSEPARATING　　　ABSTRACTAimToimprovethecollectingrateoftheadultsofTrichobiharzia.MethodsTheadultsinvenaportaeandhep

2、aticaeinternaethodsofexsomatizationandretrogradepouringinvenaofliversofducks.Theadultsinlivers,venaportaeandvenamesentericaofducksethodofpouringaortadescendens.ResultsAlotofnon-traumaticlivingadultsandnon-traumatcouldbecollectedbythesemethords.Thecollectingrateofthepouringethords(p＜0.05).Co

3、nclusionsThemethodofpouringore***,direct,practicalandpouringcollectingmethod　　毛毕属（Trichobilharzia）吸虫为鸟类血吸虫，其尾蚴可侵袭人体引起***反应性皮炎，该属吸虫宿主较多，家鸭是毛毕属吸虫主要的终宿主之一［1～10］。从家鸭体内分离出成虫，是探究其形态、结构并进行分类的重要基础。在淮河水系毛毕属吸虫探究的过程中，对毛毕吸虫成虫的分离方法进行了初步探究，取得了较为满足的结果，现报道如下。　　1　材料和方法　　1.1　材料　　1.1.1　病鸭　用毛毕属吸虫尾蚴（50条）人工感染的、并

4、在院动物房内饲养30天以上的雏鸭（为当地居民孵化的家鸭）；购自当地居民（渔民及农民）于毛毕吸虫流行水域内放养1年以上的阳性家鸭。　　1.1.2　药品器材　肝素（Ehter.批号：930407，上海浦江应用生物化学探究所。）乙醚（Diethylether，批号：960423，宜兴市第二化学试剂厂）、注射器、9号注射针头、吊瓶、解剖针、橡皮导管、玻璃导管、手术刀、剪等。　　1.2　方法　　1.2.1　肝门静脉、肠系膜静脉解剖法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，用乙醚麻醉后，剖开胸腹部，将肝门静脉和肝静脉结扎，用眼科剪、解剖针和“0”号羊毫剖检肝门静脉和肠系膜

5、静脉分离成虫。即从较细的肠系膜静脉开始，分段以解剖针刺破静脉，并以解剖针从静脉远端驱赶血液（成虫）从刺***流出，用羊毫轻取流出血液至含有生理盐水的平皿中，用生理盐水反复清洗换水，直至虫体被洗净为止。最后在解剖镜下收集成虫。　　1.2.2　在体肝脏灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在兔解剖台上，在翅根部静脉注射2ml肝素钠（12500U），随即用乙醚麻醉后剖开胸腹部，暴露内脏（操纵中应避免划伤心脏和肝脏）。接着在肝静脉出口远端和门静脉起始端各作一切口，分别插进导进管和导出管（上述两管可由普通玻璃吸管替换，其是非、粗细根据鸭子的大小和静脉的粗细选用）。将含有生理

6、盐水的500ml吊瓶，置于2.5m高处，通过输液皮条和导进管相连，接通生理盐水，生理盐水和成虫一起即可从门静脉导出管口流出（抬高导进端解剖台效果尤佳）。　　当流出液中含有较多组织液和血液时，可在量杯中换水沉淀几次，每次5min。若流出液较清楚，立即吸进小培养皿内，在解剖镜下或用肉眼直接分检。　　1.2.3　离体肝脏灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，在翅膀根部注射2ml肝素钠。随即用乙醚麻醉后解剖，暴露内脏。用止血钳或缝合线分别夹（扎）住肝静脉和门静脉起始端，仔细分离肝脏，并移至平皿内。然后将连有生理盐水吊瓶的吸管慢慢插进肝静脉内，接通生理盐水进行灌

7、注，将门静脉流出液倒进300ml量杯内，沉淀，换水2次，缓慢弃往上液，沉淀液倒进小平皿内，在解剖镜下或手持放大镜用肉眼直接分检。　　1.2.4　肝门静脉及肠系膜静脉同时灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，在翅膀根部注进2ml肝素钠，雏鸭酌减，用乙醚麻醉后，迅速打开胸腹腔，暴露内脏。用止血钳夹住肝静脉，将连有生理盐水吊瓶的9号针头插进降主动脉内，随后将门静脉起始端剪断，用一漏斗放于大、小肠的下方。接通生理盐水，流出液经尼龙X过滤，将阻留物翻进含生理盐水的培养皿中，直接镜检。　　2