第七章需氧和兼性厌氧球菌的鉴定

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1、微生物学检验第七章需氧和兼性厌氧球菌鉴定返回总目录本章内容第一节葡萄球菌属2第二节链球菌属3第三节肠球菌属4第四节奈瑟菌属5概述1学习目标及重点学习目标：1.掌握：葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的主要生物学特性和微生物学检验，尤其是它们的鉴定依据和鉴别要点2.熟悉葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的临床意义本章重点：1.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的主要生物学特性和微生物学检验2.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的临床意义概述球菌的种类很多，根据革兰染色性不同分为革兰阳性和革兰阴性球菌。致病性球菌称病原性球菌

2、主要引起化脓性炎症又可称为化脓性球菌第一节葡萄球菌属葡萄球菌属细菌为一类触酶阳性的革兰染色阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。广泛分布于自然界并构成人体的正常菌群。大多非致病，有少部分引起化脓性感染。主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等35个种，17个亚种一、生物学特性1.形态与染色本属菌多为球形，直径0．5～1．5um。葡萄球菌无鞭毛，无芽胞、无荚膜（1）在液体培养基上：呈单个、成双或短链状排列（2）在固体培养基上：呈葡萄串状排列（3）脓汁标本中：呈单个散在或少数呈葡萄串状排列第一节葡萄球菌属金黄色葡萄球菌（脓

3、汁）镜下形态金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态第一节葡萄球菌属2.培养特性营养要求不高，在普通营养琼脂（普皿）上生长良好。在20%CO2中有利于毒素形成（1）在液体培养基：呈均匀混浊生长（2）在普皿上：形成1～2mm、圆形、光滑、边缘整齐、不透明、有色菌落。不同菌株产生不同的脂溶性色素，如：金黄色、白色、柠檬色金黄色葡萄球菌金黄色脂溶性色素第一节葡萄球菌属表皮葡萄球菌在普通琼脂平皿上的白色色素表皮葡萄球菌在血平板上的白色色素2.培养特性第一节葡萄球菌属（3）在血皿上金黄色葡萄球菌和溶血性葡萄球菌，能产生溶血毒素，在血平板上产生β-溶血。其他葡萄球菌无

4、此现象金黄色葡萄球菌在血平板上24h菌落2.培养特性（4）在高盐甘露醇平板上：大多数葡萄球菌耐盐性强（10%～15%g/LNaCl培养基中生长）。此平板常作为选择性培养基，菌可分解甘露醇使指示剂呈淡黄色。G-菌在此平板上不生长金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上的淡黄色菌落2.培养特性第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属（5）卵黄高盐琼脂平板：金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶，在此培养基上，菌落周围可形成白色沉淀环。表皮葡萄球菌亦可生长，但无白色沉淀环。2.培养特性金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌在卵黄平板上生长现象第一节葡萄球菌属3.生化反应：葡萄球菌的生化活

5、性强，能分解多种糖类，蛋白质和氨基酸，触酶阳性。触酶阳性阴性对照发酵葡萄糖第一节葡萄球菌属4.细胞壁抗原主要类型有下列两种蛋白抗原*又称为葡萄球菌A蛋白（SPA），具有种、属特异性的完全抗原。SPA可与人类的IgG的Fc段非特异性结合，而不影响Fab段与特异性抗原结合的功能，它作为检测多种微生物抗原的实验室技术的重要试剂，可进行简单、快速的协同凝集试验多糖抗原具有型特异性的半抗原。金黄色葡萄球菌-核糖醇磷壁酸；表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌-甘油磷壁酸。检测磷壁酸抗体有助于金黄色葡萄球菌感染的诊断和预后判断第一节葡萄球菌属5.分类葡萄球菌属可

6、根据DNA的同源性、色素、生化反应及是否产生凝固酶等不同方法进行分类。6.抵抗力葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞细菌。*根据是否产生凝固酶分凝固酶阳性凝固酶阴性葡萄球菌二、临床意义第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属微生物检验程序标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等直接涂片镜检革兰阳性球菌分离培养生长现象色素、溶血鉴定毒素测定药物敏感试验生化反应：血浆凝固酶、甘露醇、耐热核酸酶幼猫试验报告形态染色：革兰阳性球菌第一节葡萄球菌属1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺液和浓液等。三、微生物学检验2.直接涂片：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳

7、性呈葡萄串状排列球菌，即可做出“查见革兰阳性球菌，葡萄串状排列，疑为葡萄球菌”的初步报告。第一节葡萄球菌属3.增菌培养血液标本增菌培养，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可进行进一步分离培养和革兰染色专家提示☞正常情况下无菌状态的体液标本如脑脊液，浆膜腔积液和关节腔抽出液等，直接涂片检查具有重要价值，其他体液标本伴有炎症细胞也有参考价值4.分离培养（1）血平板：35℃18～24h（2）高盐甘露醇平板或高盐卵黄平板(*进行葡萄球菌

8、菌落特征复习)第一节葡萄球菌属5.生化反应：（1）触酶试验：阳性。（2）凝固酶试验：玻片法和试管法。第一节葡萄球菌属5.生化反应（3）耐热DNA试验表