原发性肝癌患者tnf

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1、原发性肝癌患者TNF武文杰1刘瑞丽2王苏1毛淑平1李韶山1姬明丽31.新乡医学院第三附属医院普外科，河南新乡453003；2.新乡医学院药理学教研室，河南新乡453003；3.新乡医学院生理学教研室，河南新乡453003[摘要]目的探讨TNF-α、IL-1β、IL-10在原发性肝癌患者血清水平及肝癌组织的变化，分析原发性肝癌患者TNF-α和IL-1β、IL-10表达的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验检测原发性肝癌及正常体检人群各63例血清中TNF-α、IL-1β和IL-10的表达，应用免疫组化方法检测63例原发性

2、肝癌组织标本的TNF-α、IL-1β和IL-10蛋白的表达情况，分析表达与原发性肝癌及组织学分型之间的关系并做相关性分析。结果TNF-α、IL-1β在原发性肝癌患者血清中的表达高于正常体检人群，IL-10水平低于正常体检人群，差异具有统计学意义（P<0.05）。不同组织分型原发性肝癌患者血清中TNF-α、IL-1β、IL-10水平无差异（P>0.05），上述结果具有统计学意义。原发性肝癌组织中TNF-α蛋白的表达与IL-1β蛋白的表达正相关（r=0.372、P=0.000），与IL-10蛋白的表达负相

3、关（r=﹣0.322、P=0.000）。结论细胞微环境的改变是PLC发生发展的关键环节，慢性炎症损伤是PLC恶性生物学行为的前提，由TNF-α、IL-1β和IL-10介导的炎症反应失衡参与细胞微环境改变，并加剧肿瘤病理进程。[.jyqkarylivercancer，PLC）是指发生在肝细胞或肝内胆管细胞的恶性肿瘤，其发生发展与细胞微环境的改变密切相关[1-2]。细胞微环境由细胞因子（cytokine，CK）网络相互调控。细胞因子分为促炎CK和抗炎CK，促炎性CK主要有：肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis

4、factorα，TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ）等。抗炎性CK主要有：白介素-4（interleukin-4，IL-4）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）、白介素-13（interleukin-13，IL-13）等。本研究通过对比PLC患者和正常人血清TNF-α、IL-1β、IL-10水平，检测PLC患者肝组织细胞TNF-α、IL-1β、IL-10蛋白表达，探讨TNF-α、IL-1β、IL-10所调控的

5、炎症反应失衡在PLC病理变化中的作用，为PLC的早期诊断提供实验室指标。1资料与方法1.1一般资料收集2008年6月—2013年6月新乡医学院第三附属医院经影像学检查及病理学确诊的原发性肝癌患者63例，按组织分型：肝细胞癌47例、胆管细胞癌10例、混合细胞癌6例。确诊后均经手术治疗。随机抽取正常体检人群63例，经临床实验室检测无HBV、HCV及HIV等病毒感染、无心脏病、高血压、肾炎、呼吸道感染等疾病，无家族肿瘤病史。1.2主要试剂人TNF-α酶联检测试剂盒、人IL-1β酶联检测试剂盒、人IL-10酶联检测试剂盒

6、、鼠抗人TNF-α免疫组化试剂盒、鼠抗人IL-1β免疫组化试剂盒、鼠抗人IL-10免疫组化试剂盒均购于北京博奥森生物技术有限公司。1.3研究方法所有原发性肝癌患者及正常体检者均在晨起6：30-7：00空腹外周静脉采血，分离血清置-20℃冰箱保存，实验前迅速解冻，严格按照说明书进行双抗体夹心ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β和IL-10水平。原发性肝癌患者手术切除的肿瘤组织标本修剪成若干1cm3大小组织块，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋、切片，备免疫组化分析。1.4统计学处理使用SPSS13.0统计学软件处理

7、数据，原发性肝癌患者及正常体检人群血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平比较、不同组织分型肝癌患者血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平比较采用单因素方差分析及LSD-t检验。原发性肝癌组织中TNF-α、IL-1β和IL-10蛋白的表达相关性分析采用Spearman秩相关分析。检验水准a=0.05。2结果2.1PLC患者及正常体检人群血清中TNF-α、IL-1β和IL-10水平比较PLC患者血清TNF-α、IL-1β水平高于正常体检人群，差异具有统计学意义（F=21.615，p=0.000；F=18.02

8、6，p=0.000）。PLC患者血清IL-10水平低于正常体检人群，差异具有统计学意义（F=16.152，p=0.000）。见表1。2.2不同组织分型PLC患者血清中TNF-α、IL-1β和IL-10水平比较肝细胞癌、胆管细胞癌、混合细胞癌3种组织分型的PLC患者血清中TNF-α水平相比无差异（F=2.042，P=0.051；F=1.815，P=0.148；F=2.663