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1、结核性胸腔积液中细胞因子的变化：邵燕丽,吕小华,吕世静*,黄罗佳,何德,陈文青【摘要】 目的:观察不同情况下结核性胸腔积液中3种致炎细胞因子IL-12、IL-18、TNF-α和2种抑制性细胞因子TGF-β1、IL-10的变化。方法:采用ABC-ELISA及双抗体夹心ELISA进行检测,并进行相关性分析。结果:除IL-18外,IL-12、TNF-α、IL-10胸水中含量都远远超过血清中的含量,TGF-β1血清中含量远远超过胸水中含量(P<0.05或P<0.01)。结论:IL-18可能用作加强疫苗保护性的一种辅助成分;证明细胞因子IL-12、TNF-α、
2、TGF-β1、IL-10与结核病免疫发病密切相关。【关键词】胸腔积液/结核细胞因子/致炎性细胞因子/抑制性 结核病（tuberculosis,TB）是世界上引起死亡的最严重的感染性疾病,结核分支杆菌（mycobacteriumtuberculosis,Mtb）是结核病的病原。近年来,由于耐药Mtb株的出现,及爱滋病（AIDS）合并结核病正成为HIV阳性人群最主要的死亡原因,对TB免疫发病机制的研究及发展新的治疗方法得到了日益广泛的重视。单核巨噬细胞在结核病的免疫过程中起着中心的作用,不仅吞噬Mtb并控制其生长,而且还分泌大量的细胞因子,包括致炎细胞因子和抑制性细
3、胞因子调节巨噬细胞功能和T细胞反应［1］。本研究中对结核性胸腔积液(pleuralfluid,PF)中主要由单核巨噬细胞的3种致炎细胞因子IL-12、IL-18、TNF-α及2种抑制性细胞因子TGF-β1、IL-10进行研究,以加深对TB免疫发病机制的了解,为发展新疫苗和开拓新疗法提供依据［2,3］。 1材料和方法 1.1材料收集2005-03/2006-04,湛江市结核病防治所，结核性胸腔积液患者的胸水及入院时的血清标本共39例,男31例,年龄22～83岁,女8例,年龄18～62岁。已按结核病诊断标准确诊为结核病。根据患者入院情况分为初治组和复治组,其分类标
4、准按中华医学会结核病学分会《肺结核诊断和治疗指南》。本研究中初治组患者29例,复治组患者10例。按1998年全国结核病分类法研讨会制定的中国结核病分类法,对患者进行分型。39例患者中,Ⅱ型（血行播散型肺结核）中急性粟粒性肺结核1例;Ⅲ型（继发型肺结核）28例;Ⅳ型（结核性胸膜炎）10例。humanIL-12total(p40+p70)、humanIL-18试剂盒购自奥地利BenderMedSystems;人TNF-α、TGF-β1、IL-10试剂盒均购自深圳晶美公司ELx800型酶标仪为美国Bio-Tek公司产品。 1.2方法 1.2.1胸水标本的采集临床采集
5、检者新鲜穿刺胸水约5mL,以3000r/min离心15min,分装,-20℃保存。血清标本为入院时常规检查所抽全血标本,分离血清,-20℃保存待用。 1.2.2细胞因子的检测细胞因子检测均按试剂盒说明书进行。进口试剂检测原理为ABC-ELISA,是将标本或标准品加入预先包被相应抗体的微孔条,再加入生物素标记的相应mAb,孵育,洗去未结合的标记抗体；加入抗生物素蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP),再孵育后,洗去多余部分,加入底物显色,显色深浅与标本或标准品含量成正比。通过酶标仪检测的标准品吸光度绘制标准曲线,进而根据样品的吸光度得出样品浓度。进口分装试剂检测
6、为双抗体夹心ELISA,是将标本或标准品加入已包被相应抗体的微孔条中,孵育后洗板;然后加入生物素化的抗体和HRP标记的亲和素,洗去多余成分后加入显色剂。根据酶标仪检测的标准品吸光度绘制标准曲线,根据样品吸光度从标准曲线上查出样品含量。 1.2.3统计学处理用SAS软件进行。先对总体进行正态性检验,若为正态总体,其统计学描述为x±s,组内比较用配对t检验;若为非正态总体,统计学描述为M±QR（中位数±四分位数间距）,组内比较用Wilcoxon符号秩检验。用SAS程序中关于相关和回归分析的程序进行各细胞因子间相关性分析。 2结果 2.1初治组、复治组2类细胞因子
7、水平及相关性分析 2.1.1初治组、复治组2类细胞因子水平除IL-18外,其他几种细胞因子血清与胸水中浓度都有显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);初治组与复治组之间血清与胸水中几种细胞因子浓度均无统计学意义;复治组TGF-β1胸水与血清中含量无统计学意义(表1)。 2.1.2两组胸水中各细胞因子水平相关性分析(1)初治组各细胞因子水平间相关性分析:IL-12与TGF-β1间呈正相关（r=0.3931）,IL-12与IL-10间呈正相关（r=0.5508）,IL-18与TGF-β1间呈正相关（r=0.4597）,TNF-α与IL-10间也
8、呈正相关(
