hplc标准曲线法测维东力饮料中的山梨酸钾结果报告

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1、小组成员：赵学松201346603002唐宁玲201346603030何少川201346603026谢双201346603032刘雅兰201346603055HPLC标准曲线法测维东力饮料中的山梨酸钾方法：高效液相色谱法CONTENTS近年来，随着经济水平的升高，人们对食品的要求越来越高，不仅要满足色香味俱全，还要提供营养，这就促使添加剂行业发展迅速。一些厂家为获取暴利，不惜以牺牲消费者健康为代价，添加工业生产添加剂或者是添加剂量超标，这些都严重危害消费者健康，今年来添加剂问题更是越演越烈，各厂家应遵守法

2、律法规及卫生标准。本实验意义便是检测一般饮料水中防腐剂山梨酸钾是否超标，规范防腐剂的安全使用。测定意义1掌握HPLC测定饮料水中山梨酸钾的原理和方法2熟悉饮料中山梨酸钾的样品处理方法3了解HPLC的基本结构与使用方法4熟悉HPLC仪器的操作流程5培养科研创新思维6提高人们对食品安全卫生的意识实验目的样品除去二氧化碳和乙醇后，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经C18液相色谱仪分离后，紫外检测器254nm波长处检测，以色谱峰的保留时间定性，利用色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系而进行定量分析实验原

3、理实验器材：高效液相色谱仪，配备紫外检测器，恒温水浴箱，25ml容量瓶2个，10ml容量瓶5个，50ml烧杯1个，5ml刻度吸管2个，玻棒，PH试纸，胶头滴管，称量纸，油性笔，药匙，万分之一天平，0.45μm滤膜，实验器材及试剂试剂：1甲醇500ml：色谱纯2乙酸铵溶液（色谱纯）：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000ml，经微孔滤膜过滤。3山梨酸钾标准储备液：准确称取0.0080g山梨酸钾，加水溶解并定容至25ml。此溶液每毫升相当于含山梨酸0.32mg。4标准使用液：准确吸取不同体积山梨酸钾标

4、准储备溶液将其稀释成山梨酸钾含量分别为0.000mg/mL，0.020mg/mL，0.040mg/mL，0.080mg/mLl，0.160mg/mL，0.320mg/mL的标准液。5超纯水若干6氨水：氨水与水等体积混合。样品处理取10g（精确至0.001g）于50ml烧杯，如含有乙醇，需水浴加热除去，再转移至25ml容量瓶用水定容，用氨水（1+1）调PH至中性，用水定容至刻度，0.45μm过滤。待测。实验步骤取6只10ml的容量瓶分别编上号码，按以下表配置标准系列配置标准系列编号012345标准使用液（m

5、l）0.00取后一个5ml取后一个5ml取后一个5ml取后一个5ml10蒸馏水(ml)10.05.05.05.05.00.0色谱条件：色谱柱：C18；流动相：甲醇：1.54g/L乙酸铵溶液=5：95；流速：1.0ml/min检测波长：254nm；进样量：10μl。取处理液和标准使用液各10μL注入高效液相色谱仪分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样液中被测物质含量，供计算。测定实验结果：山梨酸钾结果编号保留时间（min)峰面积峰高0———117.78793131939164217.75

6、4186756868017317.6873423004132692417.5547219531277430517.35514740557542191样品17.6574358042105300数据处理：山梨酸钾标准曲线图结论：R2=0.99956，故在0.000~0.320mg/ml浓度范围内线性关系良好。论：R2=0.99956，故在0.000~0.400mg/ml浓度范围内线性关系良好。样品所测得的峰面积是4358042根据公式Y=40000000X-56053得样品的浓度为0.110mg/ml结果分析

7、根据GB2760-2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准规定：饮料类食品中山梨酸钾最大使用量为0.5g/Kg，本次实验所用维动力山梨酸钾的浓度小于0.5g/Kg，所以该饮料中山梨酸钾未超标。结论注意事项1.玻璃器皿在使用前要清洗干净。2.样品称量前需超声除气，避免影响称量的准确。3.加样之前需用甲醇溶液清洗微量进样器10~15次，再用待测也润洗2~5次。4.线性关系在0.000~0.320mg/ml内良好，相关系数大于0.999.CONTENTSCONTENTS5标准溶液的配置，标准品各250mg不进

8、行称量配置，采取统一配置进行稀释。6流动相等采用色谱纯，实验用水必须采用超纯水不用蒸馏水，否则进行过滤处理，保护色谱柱。7HPLC分析时保证足够的平衡时间，即后稳定时间，避免出现峰前移趋势。1本次实验，因多组进行同一组实验，波长的调整未调准。2山梨酸钾的最大吸收峰在254nm，但测时用230nm，会是本实验灵敏度下降，实验数据结果不准确讨论1线性范围在本方法选定的色谱条件下，山梨酸钾在0.000-0.320㎎/ml范围内,有良