肺结核患者t细胞亚群测定分析

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1、肺结核患者T细胞亚群测定分析结核分枝杆菌引起的结核病是一种严重危害人类健康的慢性传染病，在历史上曾经夺去数以万计的生命。现在全球每年约有800万新感染病例，每年死亡人数将超过400万[1]。　　我国结核病流行情况十分严峻，据文献资料全国结核杆菌感染人数超过4亿，活动性肺结核患者超过600万，在全球22个结核病高流行国家中居第二位，仅次于印度[2]。结核分枝杆菌是一种细胞内寄生菌，引起的免疫反应主要是细胞免疫，本研究用流式细胞技术检测分析了2011年4～9月我院42例结核患者CD3、CD4和CD8的表达，来了解细胞免疫功能在结核病人中的变化，探讨免疫功能在结核病人中所发挥的作用。

2、现将结果报道如下。　　1研究对象　　所有研究对象均为我院住院患者42例，其中男29例，女13例，最小年龄16岁，最大年龄78岁，平均36.5岁。所有病例都经痰涂片抗酸杆菌染色或结核菌培养阳性确诊，并分为2组，初治组22例（首次发现结核菌感染，并从未经过抗结核治疗或抗结核治疗在1周以内），复治组20例（有过结核病史，进行过抗结核治疗，重新感染或者复发）。同时用10例正常健康人作为对照组。　　2研究方法　　2.1试剂与仪器流式细胞仪为BDFACSCantoIIFloetry，CD483混合抗体购自美国BD公司，其中CD4抗体FITC（异硫氰酸荧光素）标记，CD抗体PE（藻红蛋白）标

3、记，CD抗体PE-Cy5标记。　　2.2试验方法　　2.2.1采集初治组、复治组以及对照组患者全血各2ml，EDTA-K2抗凝。　　2.2.2混匀抗凝血，取100ul加入试管。　　2.2.3加10ulCD483试剂，室温，避光孵育15min。　　2.2.4加入500ul溶血素，室温，避光孵育10min。　　2.2.4加入500ulPBS（PH=7.2，NaCL8.0g，KCl0.2g，Na2HPO4.H2O2.9g，KH2PO40.06g，　　加双蒸水至1000ml），室温，避光孵育5min。　　2.2.6设置好测试方案，参考仪器仪器说明书。　　2.2.7设置好阴性对照，上机测

4、试，有必要进行适当颜色补偿。　　2.2.8检测样本。　　3统计分析　　结核病人初治组、复治组及对照组外周血T细胞亚群检测结果比较采用方差分析。男女外周血T细胞亚群检测结果比较采用两样本资料t检验。P0.05，差异无显著统计学意义；CD8初治组、复治组、对照组3组比较P>0.05，无统计学意义，初治组、复治组2组比较P值>0.05，差异有显著统计学意义；CD4/CD8初治组、复治组、对照组3组比较P0.05，差异无显著统计学意义，见表1。　　表1.不同组T细胞亚群检测结果　　4.2不同性别T细胞亚群检测结果42例结核病人男女外周血T细胞亚群检测结果比较见表2，CD3、CD4、CD

5、8检测无性别差异（P>0.05），见表2。　　表2.不同性别T细胞亚群检测结果　　5讨论　　近年来，结核病的发病率呈增高趋势[3]。同时，结核病也是引起HIV感染患者死亡的重要原因之一，据报道2008年全球200万HIV阳性死亡患者中，有50万患者同时患有结核病[1]。结核分枝杆菌是一种细胞内寄生菌，引起的免疫反应主要是细胞免疫，其中以CD4T淋巴细胞为主。当受到抗原刺激后，CD4T细胞开始活化、增殖并分化成效应细胞清除抗原，随后少数细胞分化为记忆细胞存留于机体内，再次遇到同一抗原时，迅速做出快速敏捷的特异性应答反应来保护机体，因此CD4T在抗结核感染中发挥重要的作用，是主要的

6、免疫细胞。CD3分布于成熟T细胞表面，CD3水平在初治组、复治组、对照组中比较有差异，在初治组、复治组中水平低，说明结核病人在发病阶段细胞免疫功能受到抑制，复治组水平更低说明结核病人细胞免疫功能和病程的长短有关，并且恢复较慢。CD4主要分布于T细胞，也分布于胸腺细胞以及某些B细胞、单核细胞。其主要生理功能是分泌细胞因子，从而放大免疫反应。本研究显示CD4在复治组中高于初治组，说明CD4T细胞在复治组病人中的水平得到一定恢复。CD8T细胞与CD4T细胞共同维持机体的免疫稳定，CD8在结核病的免疫过程中需要CD4的共同参与才能发挥作用，且保持一定的比例，当各种病因导致其比例失调，机

7、体免疫功能就会表现异常。本文显示初治组与复治组CD8均高于对照组，初治组与对照组、复治组与对照组比较均有统计学差异（P<0.05），并且CD4/CD8比值发生颠倒，表明结核患者均细胞免疫功能发生了严重紊乱。