五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析

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1、博士学位论文论文题目：五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析作者姓名段文凯指导教师孙培龙，李钓敏学科专业生物化工所在学院生物工程学院提交曰期２０１７．１１浙江工业大学学位论文原创性声明本人郑重声明，独立进行：所提交的学位论文是本人在导师的指导下研宄工作所取得的研宄成果。除文中己经加以标注引用的内容外，本论文不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研宂成果，也不含为获得浙江工业大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式

2、标明。本人承担本声明的法律责任。作者签名日期：年＂月＜日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江工业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于一１、保密□，在年解密后适用本授权书。２、保密□，在二年解密后适用本授权书。３、保密口，在三年解密后适用本授权书。４、

3、不保密Ｇｆ。“”（请在以上相应方框内打Ｖ）－＂。ｒ日：作者签名：衫５：ｔ日期年月｜导师签日期年｜月４日浙江工业大学博士论文五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析摘要凤梨草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，其营养价值极高，富含丰富的维生素Ｃ、花青素等，极受市场欢迎。凤梨草莓以体大、颜色一鲜艳著称，但香味较淡。五叶草莓是种具有较强的抗病性和抗寒性野生草莓，其果实有红色和白色两种。五叶草莓的红果果实香味较淡，而白果果实香味浓郁。本论文以五叶草莓为材料，通过

4、转录组测序、定量ＰＣＲ、ＲＮＡｉ千涉等手段对五叶草莓色素及香味合成的相关基因表－达调控进行了分析，利用ＧＣＭＳ等技术手段对五叶草莓红白果的香味物质进行了分析。，以期为草莓新品种的选育提供理论基础本文结果如下：１．五叶草莓红白果之间显著差异表达基因有２２７１个，其中在红果中显著上调的基因有１１６４个，下调的基因有１１０７个，这些差异基因大部分集中在植物的次级代谢通路上。色素合成途径共发现３３个差异表达基因１５个，在红果中显著上调的基因有，其中显著差异表达的共有ＣＨＩ，ＤＦＲ，ＡＮＳＩ，ＵＦＧＴ，

5、ｂＨＬＨ９４；显著Ｔ调的基齿有Ｆ３Ｈ，ＡＮＳ２，ＡＮＲ，ＭＹＢ２８ｂＨＬＨ１８〇，２．比较了微波萃取、超声萃取、室温浸提三种常用的色素萃取方法，发现微波萃取相比超声萃取一、室温浸提，虽然效率更高，但在定条件下，会导致色素的降解，其中，影响色素降解最大的因素为萃取温ｉ浙江工业大学博士论文五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析度，其次为萃取时间。虽然在髙温长时间萃取条件下，色素会有所降解，但对萃取物的抗氧化能力却没有影响。为真实的体现草莓果实中色素的情况，采用室温浸提提取草莓色素，并对萃取

6、溶剂、萃取剂浓度、酸浓度、萃取时间、料液比等萃取条件进行了优化，最优条件为：萃取剂为７５％甲醇＋１％盐酸；料液比为１：６（ｍ／ｖ）；萃取时间４０小时；±２。在该条件下，草莓色素的萃取得率为：１３．７８．４０ｍｇ／１００ｇＦＷ３．对五叶草莓红白果实发育过程中色素含量及色素合成相关基因表达／仿Ｃ７７／、的相关关系进行了分析，发现果实发育过程中，结构基因Ｃ、丑、ＤＭ、Ｈｔ／ＦＧ；Ｔ及转录因子ＭＰＦｉＯ均随色素的增加而增加，而Ｆ３Ｈ随黄酮含量增加而增加，统计分析发现，在五叶草莓红果果实发育期间Ｃ／灯、Ｃ

7、Ｍ、Ｚ）ｉ叹和川的表达呈现显著，花青苷含量与１’丑和遍相关，而柯＾、们５的表达与色素的相关性不显著。类黄酮含量与们丑基因表达显著相关。在五叶白草莓发育期间，没有基因表达与色素及类黄酮含量呈现显著相关性。４．克隆了色素合成途径中的关键基因１＞／叹的序列，ＤＦｉ？的ｃＤＮＡ序列长１０５０ｂ，编码３４９个氨基酸，分子量为３８．９９２ｋＤａ，等电点为６．２ｐ，进化树分析发现ＦｐＤＦｉ？同其它草莓物种接近，ＤＦＲ的二级结构主要由－－折叠构成。ＤｉＷ基因的ＤＮＡ长度为Ｐ，然后是ａ螺旋和无规则卷曲ｇ２０８０ｂ

8、ｒｐ，由五个内含子分开，同森林草莓ｖｅ＊ｓ〇３）有９５％的同源性，对９个红果及９个白果的的ｇＤＮＡ序列进行了ＳＮＰｓ分析，共发现２７个ＳＮＰｓ，其中７０．４％位于内含子，２９．６％位于外显子，在外显子一中，１２．５％的ＳＮＰｓ为无义突