高中生物选修三专题复习.ppt

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1、基因工程概念基因工程是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术定向改造生物啦!1、基因工程又叫做_______或__________。基因工程相关要点基因拼接技术DNA重组技术2、基本工具:“分子手术刀”:“分子缝合针”:基因进入受体细胞的载体:3、基本操作步骤:运载体DNA连接酶限制性核酸内切酶1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建(核心)3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基

2、因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平新生物类型、生物产品剪切→拼接→导入→表达基因重组黏性末端黏性末端1.限制性核酸内切酶一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(切割DNA分子)来源:主要从原核细胞分离作用:作用结果:EcoRI重难点剖析:基因工程的“专用工具”形成平未端(SmaI)及黏性未端(EcoRI)1)、种类:2)、作用部位:E·coliDNA连接酶(黏性末端)T4DNA连接酶(黏性末端和平末端)磷酸二酯键DNA连

3、接酶可把平未端或黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即相当于把梯子两边的扶手的断口连接起来,这样一个重组DNA分子就形成了。2.DNA连接酶——“分子缝合针”3.分子运载车——运载体(1)作用:将目的基因送入受体细胞(2)具备的条件:a.能自我复制.b.具有一个或多个酶切位点.c.有标记基因.d.对受体细胞无害.质粒、噬菌体、动植物病毒(3)种类:质粒——细菌拟核DNA之外结构简单、能自主复制的很小的环状DNA分子。小结基因工程的工具限制酶主要存在于原核生物中具有专一性(识别序列)切开DNA分子的磷酸二酯键DNA连接酶连接磷酸二酯键种类E.coliDNA连接酶T4DNA连接

4、酶运载工具具备的条件结构简单,大小适中能在宿主细胞中自我复制并稳定存在具一个或多个限制酶切位点具标记基因质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒(一)目的基因的提取目的基因:主要是指___________________。获取方法:1、____________中获取目的基因2、人工合成法:化学方法合成DNA片段(反转录法、直接合成法)3、PCR反应扩增DNA基本操作步骤从基因文库编码蛋白质的结构基因原理:DNA复制过程:加热DNA解链冷却引物结合到互补DNA链互补链合成条件:耐高温DNA聚合酶基因文库的构建:提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶切一定大小的DNA片段将DNA片

5、段与载体连接导入受体菌中储存基因组文库某种生物的mRNA单链互补DNA双链cDNA片段导入受体菌中储存与载体连接cDNA文库逆转录(二)基因表达载体构建1、基因表达载体由________、________________、_____四部分组成。目的基因启动子标记基因终止子2、启动子作用:3、标记基因的作用:RNA聚合酶识别和结合的位点,启动转录的“开关”。鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从普通细胞中筛选出含目的基因的受体细胞(1)用一定的_________切割质粒,使其出现一个切口,露出____________。(2)用_______________切断目的基因,使其产

6、生____________。(3)将切下的目的基因片段插入质粒的______处,再加入适量___________,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)限制酶黏性末端同一种限制酶相同的黏性末端切口DNA连接酶重组质粒形成过程:导入植物细胞:(三)将目的基因导入受体细胞导入动物细胞:导入微生物细胞:受体细胞导入方法体细胞受精卵受精卵显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法将目的基因导入微生物细胞原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,故早期常作为受体细胞。大肠杆菌细胞用Ca2+处理感受态细胞重组表达载体DNA溶于缓冲液混合导入目的基因是否插入转基因生物

7、染色体的DNA上(四)目的基因的检测与鉴定目的基因是否表达:目的基因是否转录:方法:DNA分子杂交方法:分子杂交方法:抗原抗体杂交鉴定——抗虫性鉴定、抗病性鉴定、生物活性鉴定等(生理、性状水平的检测)检测转基因生物转基因生物是指利用技术导入培育出的能够将新性状稳定地给后代的生物。基因工程外源基因遗传基因工程优点:打破了常规育种难以突破的,的改变了生物的遗传性状.物种之间的界限(生殖隔离)定向1.抗虫转基因植物(一)植物基因工程硕果累累:2.抗病转基因生物3.抗逆转基因作物基因工程的应用4.利用转基因改良植物的品质方法:利用转基因动物生产药

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