高中生物选修三《基因工程》专题复习课件.ppt

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1、现代生物科技专题（选修三）基因工程专题复习济源一中[zxxk学科网]《创新教学模式-打造高效课堂》一、课前提问（10分钟）1、DNA重组技术的基本工具有哪些？分别什么作用？2、基因工程的基本操作程序？核心是什么？3、基因文库和cDNA文库的区别？4、PCR的原理、过程及条件？5、基因表达载体的组成？6、将目的基因导入植物细胞的方法？7、将目的基因导入动物细胞的方法？8、将目的基因导入微生物细胞的方法？9、目的基因的检测与鉴定步骤？[zxxk学科网]10、什么是基因治疗？有几种类型？11、蛋白质工程的基本途径？1、限制

2、酶特异性的理解：一般情况下，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，这就是限制酶的特异性。但有些特例，不同的限制酶识别同一种碱基序列且切点相同。如：BamHⅠ、BstⅠ都可识别——GGATCC——序列。这两种限制酶切割DNA分子后产生相同粘性末端。如：BamHⅠ识别——GGATCC——序列,切点在G与G之间；BglⅡ识别——AGATCT——，切点在A与G之间；粘性末端均为——CTAG和GATC——。还有少数限制酶却可识别不止一种碱基序列。二、重难点剖析（20分钟）GAATTCGCTTAAAATTCG限制酶切割ＤＮＡ分

3、子示意图[zxxk学科网]CTTAAG黏性末端黏性末端基因工程疑难问题的解读：……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……EcoRⅠ……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……不同来源的DNA片段混合将不同种来源的DNA片段连接起来生物A基因片段生物B基因片段……GAATTC…………CTTAAG……酶切……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……同一种用同一种限制性酶处理

4、不同DNA片段，会形成同样的黏性末端，可进行重组。2．基因工程的基本工具的比较限制酶DNA连接酶载体作用作用部位切割目的基因和载体拼接DNA片段，形成重组DNA携带目的基因进入受体细胞作用特点(条件)常用类型(1)识别特定的核苷酸序列(2)在特定位点上切割(1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端(2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制(2)有多个限制酶切割位点(3)具有特殊的标记基因EcoRⅠ限制酶SmaⅠ限制酶E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶质粒、λ噬菌体的衍

5、生物、动植物病毒两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键3.PCR技术与DNA复制的比较PCR技术DNA复制相同点原理原料条件不同点解旋方式场所酶、引物热稳定DNA聚合酶需引物细胞内含有的DNA聚合酶，不需引物结果短时间内形成大量DNA片段形成整个DNA分子（碱基互补配对）四种脱氧核苷酸模板、ATP、酶体外复制细胞核内DNA在高温下变性解旋解旋酶催化DNA双链复制4.将目的基因导入受体细胞中的方法的比较生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞转化过程农杆菌转化法显微注射法Ca2＋处理法体细胞受精卵原核细胞

6、（大肠杆菌）目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA→表达目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子5.目的基因的检测内容和方法的比较分子水平检测具体方法技术名称①首先要导入检测（）利用（）与提取的（）杂交②其次要转录检测：（）利用（）与提取的（）杂交③最后要翻译检测：（）利用（）与提取的（）杂交转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因目的基因是否

7、转录出mRNA）目的基因是否翻译成蛋白质DNA探针基因组DNADNA探针转录出的mRNA相应的抗体蛋白质DNA分子杂交技术抗原—抗体杂交技术个体水平鉴定：包括抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性程度；基因工程产品与天然产品进行活性比较，以确定功能是否相同等分子杂交技术6.基因工程与蛋白质工程的比较项目蛋白质工程基因工程区别过程预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生

8、产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品结果生产自然界没有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现1.细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子2.质粒是基因工程中最常用的运载体3.最常