慢性阻塞性肺疾病患者痰液白介素

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1、慢性阻塞性肺疾病患者痰液白介素【关键词】阻塞性肺疾病白介素8【Abstract】ObjectiveTodeterminetherelationshipbetandaironarydisease（COPD）.MethodsCellsininducedsputumfrom30casesofCOPD,30casesofchronicbronchitisand30healthyvolunteersicropically.IL-8influid-phaseeasuredelinkedimmunosorbentassay.ResultsThepercen

2、tageofneutrophilsandthelevelofIL-8insputumfromCOPDpatientschronicbronchitispatientandnormalsubjects.FEV1%correlatednegativelyarkerforthesmokersonarydisease;interleukin-8慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种慢性气道炎症性疾病，中性粒细胞（NC）是主要的炎症细胞［1］。痰中中性粒细胞数与患者的气道阻塞、痰量高度相关，中性粒细胞释放的蛋白酶及氧化物是引起炎症损伤和肺气肿的主要原因。吸

3、烟是导致COPD的重要病因，约90%的COPD患者是吸烟者，然而仅20%的吸烟者发展为COPD［2］。在临床上常可见到同样吸烟史的人群，有的发展为气流阻塞（COPD），有的仅有咳嗽咳痰症状而无气流阻塞（慢性支气管炎），笔者猜想前者肺内IL-8表达增强，从而气道内中性粒细胞聚集增多，对气道壁破坏增加造成气流阻塞。　　1对象与方法1．1病例选择COPD组：COPD稳定期［3］患者30例，男16例，女14例，年龄52～65岁。1s用力呼气容积（FEV1）占预计值百分比为48.8%+9.6%。平均吸烟指数为400+25。单纯慢支组30例，其中男14例

4、，女16例，年龄31～60岁。1s用力呼气容积（FEV1）占预计值百分比为94.9%+3.5%。平均吸烟指数为350+25。健康组：30例，其中男15例，女15例，年龄29～62岁，FEV1%预计值102.5%+8.1%。均为非吸烟者或戒烟20年以上。以上3组受试者8周内无呼吸道感染或气道疾病加重，12周内未服用糖皮质激素类药物。1．2实验方法（1）痰标本收集和处理：应用诱导痰方法，雾化吸入3.5%的高渗盐水10～20min，鼓励病人漱口，用力咳出深部痰，肉眼选取0.5～1ml无唾液污染带有白色痰栓的痰液，加入4倍量0.1%DTT，37℃孵育

5、20min，溶解痰液，再加入上等量磷酸盐缓冲液（0.01M、pH7.4PBS）充分洗涤细胞，经48μm滤网除去黏液及细胞碎渣，2000r/min离心10min，细胞沉淀用PBS调至1×106后用细胞离心甩片机制备细胞涂片，2张做细胞分类用，另2张做免疫组化用。考虑到DTT可以破坏IL-8的二硫键，另选取1ml无唾液污染痰液，加入3ml的PBS后混匀，16000r/min离心20min，留取上清-70℃保存，待测IL-8用。（2）细胞计数及分类：用适量PBS悬浮上述细胞沉淀，取1小滴置血球计板上，计数除上皮细胞外的有核细胞，得出每升的痰细胞数。

6、若上皮细胞>50%，表明标本不合格。取两张上述制备好的细胞涂片做瑞-姬染色，油镜下数200个细胞，得出各种细胞所占百分率。（3）IL-8测定：采用酶联免疫法，IL-8试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供，操作按说明进行。1．3统计学处理均值比较用t检验，率比较用率检验，相关性用直线相关分析。　　2结果2.13组痰液中细胞计数及分类经瑞-姬染色油镜下做细胞分类计数。COPD组细胞总数为3.0×106/ml，与健康组0.32×106/ml相比差异有显著性（P<0.01），与慢支组2.5×106/ml相比差异无显著性（P>0.05）

7、。COPD组中性粒细胞分类占0.696，与健康组0.222、慢支组0.529相比差异均有显著性（P<0.01）。见表1。表13组痰液中细胞计数及分类注：与健康组相比，*P<0.01,△P>0.052.2IL-8水平比较COPD组IL-8水平为0.720pg/ml，与慢支组（0.559pg/ml,P<0.01）、健康组（0.161pg/ml,P<0.01）比较差异有显著性。IL-8是一重要炎症介质，属于趋化性细胞因子超家族中的α亚群，人IL-8基因定位于染色体4q12～21，碱基数为5.2KB，IL-8为8.0KD

8、的多肽，前体是含22个氨基酸先导序列的99多肽，经多次氮端切除后产生77aa、72aa、69aa三种形式。IL-8的两种受体形式A和B已从中性粒细胞和HL-60细胞