血型鉴定与交叉合血

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1、血型鉴定与交叉合血王炼红解读血型的定义及分类血型是指各种血液成分的遗传多态性标记。血型抗原不仅存在于红细胞上,也存在于白细胞和血小板上，还存在于各种组织细胞、多数体液中，甚至不同个体的血清蛋白间也存在型别的差异。血型系统主要分类：1.红细胞血型系统，其中又分为ABO血型系统、Rh血型系统、MNS血型系统、P血型系统、Kell血型系统、Kidd血型系统、Duffy血型系统2.人类主要组织相容性抗原系统（HLA)3.血小板血型系统（PHA）4.血清型。血清型按蛋白质可分为免疫球蛋白、血清酶、血清蛋白、补体等几大类。

2、血型鉴定血型鉴定主要用已知特异性的抗体鉴定未知的红细胞抗原，或辅助用已知抗原的一组红细胞（谱红细胞）鉴定未知血清的抗体，结合相关理论基础综合判断血型。血型鉴定以抗原、抗体免疫检测技术为基础，常用的方法有盐水介质法、微柱凝胶卡片法、聚凝胺法，疑难血型还可用聚合酶链反应（PCR）技术直接分析相关血型的基因。1.1ABO血型鉴定实验原理：根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞

3、上有无相应A抗原或/和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。试剂和材料：1)抗-A(B型血)、抗-B(A型血)及抗-A+B(O型血）分型血清，购置商品试剂。2)5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。3)受检者血清。4)受检者5％红细胞盐水悬液。ABO血型鉴定的检测方法1.试管法（1）取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标明抗-A、抗-B、抗-A+B,用滴管分别加抗-A、抗-B、抗-A+B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴

4、，混和。（2）另取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B、O细胞,用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再以滴管分别加入5％A、B、O试剂红细胞盐水悬液1滴，混和。（3)立即以1000r／min离心lmin.（4）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。（5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。4＋红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3＋ 红细胞凝集成数

5、小块，血清尚清晰。2＋ 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细 胞。1＋ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞土 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。一 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。5)凝集强度判断标准2.玻片法（1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B、抗A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B、抗-A+B分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液

6、1滴，混和。（2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。（3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与红细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。玻片作试验时，也应用低倍镜观察结果。4）结果判定ABO血型正反定型结果注释：十为凝集；一为不凝集。分型血清+受检者RBC受检者血型受检者血清+试剂RBC抗-A抗-B抗-A十B  A细胞B细胞O细胞十 ─ 十A ─十 ── 十 十B十

7、一 ── ─ ─O十 十  ─十 十 十AB ─ ─ ─5）注意事项（1）分型血清质量性能要符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。（2）试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤3次，以去除存在于红细胞表面的血清中成分及可溶性抗原。（3）试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。（4）操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。（5)按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20-24℃)内进行试

8、验，37℃可使反应减弱。（6)离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。（7)观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。（8)判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。正反定型结果不一致的原因主要有以下三个方面：一、技术性方面问题二、红细胞方面的问题三、血清方面的问题常见情况如下：1)分型血清效价太低、亲和力不强。若抗-A血清效价不高，可将A