基于l-fabpgfp转基因斑马鱼构建放射性肝损伤模型的初步探讨

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时间:2018-10-13

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1、基于L-FABPGFP转基因斑马鱼构建放射性肝损伤模型的初步探讨胡威(遵义医学院附属医院胸部肿瘤科贵州遵义563003)【摘要】目的:初步探讨以L-FABP10:GFP肝组织特异性转棊因斑马鱼建立放射性肝损伤模型的可能性。方法:出生后5天的斑马鱼,给予“剂量爬坡梯度”放疗,连续观察5天,了解幼鱼放疗安全性及安全剂量;结合“剂量爬坡”试验的结果及临床实践,选择合适的剂量进行放疗,连续观察5天,了解放疗后斑马鱼肝脏荧光强度、面积和形态的变化。结果:“剂量爬坡”试验显示:0、2、6、10、20、30、40Gy/

2、次条件下的放射处理对斑马鱼是安全的;接近临床实践剂量40Gy/次的放疗处理未见斑马鱼肝脏荧光强度、范围及形态的变化。结论:L-FABP:GFP转基因斑马鱼放疗后54hA无法通过监测肝GFP荧光变化Y解放射性肝损伤情况,该模型的建立仍需要进一步探讨。【关键词】放疗;斑马鱼;肝损伤;模型【中图分类号】R735.7【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2015)24-0017-03EstablishmentofRadiation-inducedLiverInjuryModelwithLFABP:GFP

3、TransgeneZebrafishHuWei。DepartmentofThoracicCancer,AffiliatedHospitalofZunyiMedicalCollege,GuizhouProvince,Zunyi563003,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheestablishmentofradiation-inducedliverinjurymodelwithL-FABP:GFPtransgenezebrafish.Methods5dayspos

4、t-birthzebrafishesweregivenDoseclimingtestradiationandtoassesstheradiationalsecurityandchoosethesafedoses5dayslater.Combindedtheaboveresultswithclinicalpracticestochooseappropriatedradiationaldoses,continuouslyobservedthestrength,areaandshapechangesoffluo

5、rescencefor54hafterradiation.ResultsDoseclimingtestshowthatitissafetoradiateunder0,2,6,10,20,30,40Gy/FforZebrafish.Therewerenosignificantstrength,areaandshapechangesoffluorescenceunderthedosesneartoclinicalpracticedose(40Gy/F).ConclusionTheradiation-induc

6、edliverinjuryofL-FABP:GFPtransgenezebrafishcan’tbeobservedafterradiationin54hbyevaluatingthelivefluorescencechanges.So,themodelneedfurtherresearches.【Keyword]Radiotherapy;Zebrafish;Liverinjury;Model原发性肝癌(HCC,hepatocellularcarcinoma)以手术及介入治疗为主,放疗因其剂量

7、限制性毒性,作用有限,但手术及介入治疗己遇到技术上的“瓶颈”,因而提高放、化疗疗效,是当前提高肝癌治疗水平的关键[1,2]。正常肝细胞对放疗敏感,低剂量的放射处理即可造成严重的肝损害[2】,但其机理不清,建立冇效的放射性肝损伤模型是阐明放射性肝损伤机制,减轻放射性肝损伤,以及提高放疗剂量和改善放疗疗效的前提。本文通过L-FABP10:GFP肝转基因斑马鱼,初步探讨以其建立放射性肝损伤模型的可能性。1.实验材料及方法1.1材料1.1.1试验动物L-FABP10:GFP肝组织特异性转基因斑马鱼(由西南大学罗凌

8、飞教授惠赠)。1.1.2试验主要仪器:CBI50恒温培养箱(Binder,France),MVX-10焚光显微镜(Olympus,janpan),Varian600直线加速器(Varian,USA)。1.2方法1.2.1斑马鱼放疗处理出生后5天斑马鱼被置于6孔板(多条/孔,集体喂养)或24孔板中(1条/孔,用于单一追踪),尽量减少培养孔板中的液体量,但不影响鱼的存活及活动,6MV光子线,源皮距照射,源皮距100cm,剂量率(5

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