以斑马鱼为动物模型探讨臭氧对于组织损伤后再生的作用及其机制

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1、分类号密级ＵＤＣ编号？似省似緣頭去学位论文Ｗ巧马鱼为动物模型探讨臭氧对于组织损伤后再生的作用及其机制ＴｈｅＳｔｕｄｏｆＯｚｏｎｅＦｕｎｃｔｉｏｎａｎｄＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｎＴｉｓｓｕｅＲｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｙｉｎＺｅｂｒａｆｉｓｈＭｏｄｅｌ郝研楠导师姓名何晓巧专业名称影巧医学与核医学（介入放射学）培养类型学术型论文提交日期２０巧年３月２０日南方医科大学２０１５级硕主学位论文心又斑马鱼为动物模型探讨

2、臭氧对于组织损伤后再生的作用及其机制ＴｈｅＳＵｉｄｏｆＯｚｏｎｅＦｕｎｄｉｏｎａ凸ｄＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｎＴｉｓｓｕｅｙＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎＺｅｂｒａｆｉｓｈＭｏｄｅｌｇ课题来源：自选课题学位申请人郝巧楠导师化矣何晓峰专业違称影像医学与板医学（介入放射学）培养类型学术型培养层次硕壬研究生所在学院南方医院答辩委Ｉ会主席张文清教授答辩委员会委貢单鸿教授陆Ｉ兩工教授王晓白教授陈德基教授张译月教授郭亚兵

3、教授２０１５年５月２０日广州硕壬学位论文ｋ＾斑马鱼为动物模型探讨臭氧对于组织损伤后巧生的作用及其机制硕±研究生；郝河楠指导老师：何晓峰教授摘要研究背景：临床研究表明，常见的皮肤外伤如擦伤、挫裂伤、切割伤、烧伤、烫伤和粘膜糜烂如宫颈炎等，臭氧治疗较常规治巧可加速其愈合速度；而对于临床上难Ｗ治愈的感染性创口，如糖尿病下肢溃瘍、肠瘦、食管胸腔瘦等，臭氧治疗口－二１４则可促使创愈合［］。亦有临床实践证实，对于幽口螺杆菌引起的胃十指肠溃扬，莫氧治疗可取得满意疗

4、效口。少有的臭氧相关基础实验也指出，臭氧］对于小顏肝脏组织切除后的再生也有促进作用６。［］对于皮肤创面，不论是臭氧水冲洗、奥氧气浴熏蒸治疗还是臭氧水浸浴治疗，创面感染率都可得到预防及有效控制，并且创面愈合时间均比常规消毒时间短，。国内外动物实验证明臭氧水局部冲洗可促进创面愈合。推测其原理除抗，菌外，作用机制还可能为：①臭氧能促进毛细血管开放和功能修复、提高紅细－－８－胞携氧能力ＯＨｄＧ）及血红素氧合酶１（ＨＯ１）。②诱导细胞哲基脱氧鸟巧（的生成，激活机体氧化与抗氧化反应［７］

5、。⑨刺激局部表皮生长因子ＥＧＦ表达增－多，ＴＮＦａ表达减少，加速组织细胞巧生。④增加细胞血小板衍化生长因子－－ＰＤＧＦ、转化生长因子（ＴＧＦ）、血（ＶＥ徘）、细胞周期蛋（）ＰＰ管内皮生长因子白Ｄ，１表达增加，从而加速创面愈合但没有刺激巧维母细胞生长因子表达的增加８，９。Ｗ上研究结果均表明臭氧对于组织再生具有促进作用，并且这种作用［］Ｉｗ无明显组织特异性。感染和组织损伤的先天免疫反应在生物进化过程中是商度保守的，即从低等生物到高等生物，其受损后发生的免疫反应基本相

6、同。这使斑马笛成为理想的－研究炎症和创伤修复的动物模型１０１７］。对于本实验最有利的特点为斑马鱼多［＞１个器官和组织都可１＾再生尤其料馬鶴再生模型操作容易、结构简单和组织再生，迅速。研究表明，当成年斑马鱼的尾韓被９５％切除后，在２周左右的时间内就可Ｗ快速完全再生１８。。幼鱼尾罐切除后五天可完成完全再生［］材辭与方法斑马鱼模型建立：－ｄｅｏ实验所需的野生型ＡＢｗ及Ｔｍ：１９ｉｇＧＦ型斑马鱼均由广东省人类疾（ｐ巧［］病及药物斑马鱼模型重点实验室提供。斑马鱼根据Ｗｅｓｔｅ巧ｅｌｄ

7、提供的标准饲养方式饲养［２０。所有器材在使用么前均需高压消毒２１，２２］。］［吴氧水配制：一臭氧是种极不稳定的强氧化气体，较氧气易溶于水２３２４。臭氧水的制［，］（。备直接由臭氧气体持续注入水中五分钟所得高氧液体制备仪，前沿医学）水中离子影响臭氧稳定性加速臭氧降解，化纯净的ｄｄＨ２０对于幼鱼生长及生存影响较大（附〇，仍选择含有离子的系统水为臭氧水的配制用水。实验用臭氧水浓度测定：臭氧水浓度测定：、２：１、１：１、１：、：将新鲜配制的臭氧水与系统水按照１０２１：３１４

8、ＤＰＤ、：的比例配制成臭氧水工作液，用臭氧水浓度测定试剂念（奠氧测定试剂盒，陆恒生物）半定量各比例臭氧水浓度。实验用吴氧水安全浓度测定：ＩＩ硕去学位论文－ｗ－不同浓度臭氧水中７２ｈｐｆＡＢｉｄｅ幼鱼生存曲线；将７２ｈｐｆＡＢ＼ｖｉｄｅ幼鱼分为六个组，，分别给予浓度为上述比例配制好的臭氧水处理体式显微镜下于处理后每五分钟记录各组幼鱼死亡数量，记录化。－ｉ叮睹檀（细胞调亡）染色；７２ｈｆＡＢｗｄ