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时间:2018-10-12
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1、实验糖类脂肪蛋白质的鉴定复习:组成生物体的元素和化合物组成生物体的元素基本元素主要元素大量元素微量元素铁猛碰→新木桶CHONPSKCaMgFeMnBZnMoCu组成生物体的化合物无机化合物:有机化合物:脂质、蛋白质水、无机盐糖类、核酸如何鉴定这些营养物质?实验环节材料用具讨论分析步骤实验结果实验原理一.实验原理可溶性还原糖+斐林试剂脂肪+苏丹III染液脂肪+苏丹IV染液蛋白质+双缩脲试剂淀粉+碘液50-65℃水浴加热2min砖红色沉淀橘黄色红色紫色反应蓝色1、斐林试剂(等量混合——先配现用)甲液 质量浓度为0.1g/mL的N
2、aOH溶液乙液 质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液2、双缩脲试剂A液 质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液试剂二.材料用具选材标准:1.富含该种有机物;2.颜色较浅,3.便宜、容易获得、操作简单蛋白质的鉴定(1)植物组织样液:黄豆种子(浸泡1-2天),或用豆浆(2)动物组织样液:鸡蛋清蛋清:水=1:10稀释,搅拌均匀后,用6-7层纱布过滤脂肪的鉴定富含脂肪(植物油)的种子,如花生、核桃、蓖麻等的种子还原性糖的鉴定:苹果、白梨三.实验步骤1、还原性糖的鉴定:制备组织样液分别
3、向两个试管中加入2ml组织样液将0.1g/ml的NaOH溶液与0.05g/mLCuSO4等量混合均匀后,迅速使用,加入到组织样液中1ml的斐林试剂水浴加热观察试管中的颜色变化实验结果:蓝色——棕色——砖红色沉淀2.脂肪的鉴定:制作临时装片,横切花生滴一滴苏丹III染液(3分钟)或苏丹IV染液(1分钟)染色用50%酒精漂洗观察实验结果:橘黄色或红色颗粒3.蛋白质的鉴定:豆浆或蛋白液向试管中加入0.1g/ml的NaOH溶液1ml摇匀向试管内加入0.01g/mL的CuSO4溶液4滴摇匀观察颜色变化实验结果:由蓝色变为紫色4.淀粉的
4、鉴定:向试管内注入2ml待测组织样液加入2滴碘液观察颜色实验结果:变蓝实验注意事项:糖类的检测:1、选材要用含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织。2、斐林试剂不稳定,一般配成甲液(NaOH:0.1g/mL)乙液(CuSO4:0.05g/mL)来保存,使用时必须将甲、乙两液混合均匀后使用,切勿分别加入组织样液中进行检测。脂肪的检测:1、切片要尽可能的薄。2、染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色。3、观察时找最薄处,最好只有1—2层细胞。蛋白质的检测:1、用鸡蛋蛋白时,一定要加以稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会
5、粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗净。2、双缩脲使用时,应先加A造成碱性环境,再加B。
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