前列腺酸性磷酸酶在非前列腺腺癌中的表达

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1、前列腺酸性磷酸酶在非前列腺腺癌中的表达【摘要】　　目的：探讨前列腺相关抗原前列腺酸性磷酸酶（PAP）在非前列腺癌中的表达水平.方法：分别用RTPCR方法和KN7,MKN28和MKN45）和7种乳腺癌细胞（OCUBF,OCUBM,R27,MCF7,CRL1500,YMB1E和MDAMB231）表达PAPmRNA和PAP蛋白，结肠癌、胃癌和乳腺癌肿瘤组织中PAP呈阳性表达.在检测的5种肾细胞癌细胞和肾细胞癌组织中均未发现有PAP的表达.结论：PAP是结肠癌、胃癌和乳腺癌的新靶点.【关键词】酸性磷酸酶；前列腺；腺癌　　【Abstract】AIM:To

2、studytheexpressionofprostaticacidphosphatase(PAP),aprostaterelatedantigen,innonprostatecancercellsortissues.METHODS:AvarietyofadenocarcinomacelllinesinedfortheirPAPexpressionatthemRNAandproteinlevelsbyRTPCRandKN7,MKN28andMKN45),and7kindsofbreastcancercelllines(OCUBF,OCUBM,R27,MCF

3、7,CRL1500,YMB1EandMDAMB231)asRNAandproteinlevels.Butisas,includingcolon,breastandgastriccancers.　　【Keya　　引言　　前列腺酸性磷酸酶（prostaticacidphosphatase,PAP）最早发现于1938年［1］，之后它便作为前列腺癌肿瘤标志物.与Gleasonscore和前列腺特异性抗原（PSA）相比，PAP能够更精确指示肿瘤的微转移［2］.此外，PAP还是转移性非雄性激素依赖性前列腺癌特异性免疫治疗的靶点［3］.一直以来，PAP的组织分布被认为局限于

4、前列腺以及前列腺肿瘤［4-5］.然而，有报道指出PAP也表达于非前列腺组织中［6-7］，如小肠癌［8］，胰腺内分泌瘤［8］，膀胱腺癌［9］等.最近，PAP被认为是血管内大B细胞淋巴瘤（intravascularlargeBcelllymphoma）的肿瘤标志物［10］.Inoue等［11］也曾报道了PAP在食道癌和肺鳞片细胞癌细胞中的表达.本研究拟在此基础上，进一步探讨PAP在其他腺癌中的表达水平，为非前列腺癌的特异性免疫治疗提供新的靶点.　　1材料和方法　　1.1材料　　结肠癌细胞系(colo201,colo205,colo320,SKN7,MKN28,MKN4

5、5和KATOIII),乳腺癌细胞系(OCUBF,OCUBM,R27,MCF7,CRL1500,YMB1E和MDAMB231)，肾细胞癌细胞系（RC3014,Caki1,VMRCRCAMIYA和KUR11），前列腺癌细胞系LNCaP.RNABee试剂（TELTEST），RTPCR试剂盒（Takara），TaqDNA聚合酶(PromegaCorp)，胰蛋白酶抑制剂，苯甲磺酰氟（Sigma），PAP抗体(ScyTekLaboratories.)，KIT试剂盒（DAKO）.　　1.2方法　　1.2.1RNA提取及RTPCR按照RNABee说明

6、书提取处于对数生长期细胞的总RNA，其中5μg总RNA用于cDNA的合成.用于PAP表达检测的PAP特异性引物为:上游引物:5′CTCCTCAACATGAGAGCTGC3′,下游引物：5′TATATACTCTCCAAGTTCATA3′.利用TaqDNA聚合酶进行PCR反应，共30个循环（95℃1min,60℃1min,72℃1min）.PCR产物在20g/L琼脂糖凝胶上进行检测.　　1.2.2Cs）分别作为阳性和阴性对照.　　1.2.3免疫组化甲醛固定、石腊包埋的病理切片经脱石腊后，置于含30mL/LH2O2的甲醇溶液中来封闭内源性过氧化物酶活性，然后在加入第一抗

7、体之前，用血清进行孵育以减少非特性染色.按照说明书，利用CSASYSTEMKIT试剂盒和羊抗人PAP抗体进行免疫组织化学检测.　　2结果　　2.1PAPmRNA在非前列腺腺癌细胞中的表达在所检测的5种结肠癌、4种胃癌、7种乳腺癌和5种肾癌细胞中，3种结肠癌细胞（colo201,colo205和colo320)、3种胃癌细胞(MKN7,MKN28和MKN45)以及所有的7种乳腺癌细胞中(OCUBF,OCUBM,R27,MCF7,CRL1500,YMB1E和MDAMB231)检测到PAPmRNA的表达；而在