脓毒症大鼠jak-stat信号通路对肝肿瘤坏死因子

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1、脓毒症大鼠JAK/STAT信号通路对肝肿瘤坏死因子：王强，王松柏，窦科峰，姚永明【关键词】脓毒症　　【Abstract】AIM:Thepurposeofthepresentstudyornecrosisfactorα(TNFα)inhepatictissuesofratsodelbycecalligationpuncture(CLP),78male)treatmentgroup(n=24).Atserialtimepointsineachgroup,animalsplesineTNFαmRNAandproteinexpressionlevels.RESULTS:paredal

2、controls,theTNFαmRNAlevelssignificantlyelevatedintheliver2-48hafterCLP(P<0.05)andtheproteinlevelssignificantlyincreasedat2-48h,respectively(P<0.05).BothtreatmentarkedlyreducehepaticTNFαmRNAandproteinexpressionsat2,6,24and48hfolloRNAandproteinexpressions,aybeinvolvedinJAK/STATpathRNAan

3、dproteinexpressions,ayhelptopreventthetissueinjuryaftersepsis.　　【Keyornecrosisfactor;sepsis;signaltransduction;rats;januskinase　　【摘要】目的：研究Janus激酶/信号转导和转录激活子（JAK/STAT）通路对盲肠结扎穿孔术（CLP）所至严重腹腔感染大鼠肝组织肿瘤坏死因子α（TNFα）表达的调节作用.方法：采用CLP模型，78只大鼠随机分为正常对照组(6只)、CLP脓毒症组(24只)、JAK激酶抑制剂（AG490）处理组(24只)和STAT抑制剂（雷

4、帕酶素，RPM）处理组(24只).采用逆转录多聚酶链式反应（RTPCR）测定肝TNFαmRNA水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒检测肝TNFα蛋白含量.结果：与正常对照组相比，CLP后各时间点TNFαmRNA升高明显（P<0.05），其蛋白含量在6,24,48h也增高明显（P<0.05）.AG490和RPM预处理后，与CLP组相应时间点相比，大鼠CLP6,24,48h后TNFαmRNA表达显著下降（P<0.05），蛋白水平也显著降低（P<0.05）.结论：腹腔脓毒症时TNFα表达明显升高，抑制JAK/STAT通路的活化可进一步下调肝组织TN

5、Fα的表达，这可能有助于防止脓毒症所致失控性炎症反应性组织损伤和多器官功能衰竭.　　【关键词】肿瘤坏死因子；脓毒症；信号传递；大鼠；Janus激酶　　0引言　　脓毒症是危重病患者死亡的主要原因之一，它引起的多器官功能衰竭是一个棘手的难题.炎症介质过渡表达是作用机制之一.细胞信号通路已成为目前研究的重点.Janus激活/信号转导和转录激活子(januskinase/signaltransducerandactivatoroftranscription,JAK/STAT)信号通路与脓毒症的发生发展有着密切的关系.TNFα是一种强有力的促炎细胞因子，在脓毒症的发生和发展中起着重要作

6、用［1］，脓毒症时JAK/STAT通路对TNFα表达的介导作用尚缺乏在体研究.我们采用大鼠盲肠结扎穿孔术（cecalligationpuncture，CLP）模型探讨JAK/STAT通路对脓毒症大鼠肝组织TNFα表达的影响.　　1材料和方法　　1.1材料　　雄性清洁级）治疗组（24只），CLP前0.5hSCRPM（0.4mg/kg），③和④两个处理组分别在CLP后2,6,24,48h活杀动物.各组各时间点有６只动物活杀.各组之间动物质量无显著性差异.　　1.2方法　　1.2.1CLP制作动物以20g/L戊巴比妥钠ip麻醉后沿腹正中线作1.5cm长的切口，在盲肠根部结扎盲肠.用

7、18号针在盲肠上穿通3次形成盲肠漏，并留置一橡皮引流条贯通盲肠以防针孔闭合.随后，将盲肠还纳腹腔，逐层缝合腹壁切口.术毕，立即林格液50mL/kgSC抗休克.各组动物观察至不同时相点处死并留取适量肝组织待测.　　1.2.2肝组织TNFαmRNA表达称取肝组织约30mg，以异硫氰酸胍一步法提取细胞总RNA.采用逆转录多聚酶链式反应（RTPCR）技术对转录产物进行扩增，以三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）作为内参对照.大鼠TNFα序列（扩增片段为415bp）：5′GTAGCCCACGTCGTAGCAAA3′(