脑缺血再灌注动物模型的制备及评价

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1、脑缺血再灌注动物模型的制备及评价【关键词】脑缺血;脑损伤;动物模型;大鼠　　[ABSTRACT]Objective:Toinvestigatetheapplicationofthreekindsofcerebralischemiareperfusionanimalmodelaccordingtothedegreeofinjury.Methods:Thebilateralmoncarotidarteryocclusion(BCCO),cerebralmiddlecerebralarteryocclu

2、sion(MCAO)bystringfasteningmethod,globalischemia(GI)byfourarteryocclusioniareperfusionanimalmodel.ThedegreeofbraininjurypalCA1regionandtheMorrisaze.Results:TheresultoftheexpressionofMAP2indicatedtheinjuryofGIgroupostsevere,andthedamageofBCCOgroupos

3、tmild.paredalgroup,thebehaviorchangeofreperfusionalmodelsshouldbeappliedindifferentresearches.TheBCCOmodelcouldbeusedinpreventionofmildischemia.TheMCAOmodelcouldbeusedinthechangeofcerebralfunctionandthedrugevaluation.TheGImodelcouldbeusedinrecoveryafte

4、rcerebralischemia.　　[KEYCAO)、四血管法全脑缺血再灌模型(GI)等3种常用的局灶性脑缺血再灌动物模型，观察不同脑损伤情况下的形态学改变，并评价其行为学，旨在探讨不同模型的适应性。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组　　健康雄性orris水迷宫筛选后，分为正常对照组(Normal)，双侧颈总动脉结扎20min再灌注组(BCCO)，线栓法大脑中动脉脑缺血再灌模型组(MCAO)，四血管法全脑缺血再灌模型组(GI)，每组6只。　　1.2Morris水迷宫测试　　Morris水迷

5、宫测试程序采用定位航行试验：每天4次，共3d，均在10:00am～5:00pm之间完成。将大鼠头朝池壁轻轻放入水中，计时动物自入水至找到平台时间为潜伏期，同时观察搜索站台的轨迹。记录大鼠后8次测试的潜伏期，以平均潜伏期的90%区间作为筛选学习记忆功能正常大鼠的标准。　　1.3动物模型制备　　BCCO模型：大鼠用2%的戊巴比妥(0.2mL/100g)麻醉，颈正中切口逐层切开皮肤及皮下组织，分离胸锁乳突肌，切断二腹肌前腹，暴露颈总动脉(moncarotidartery，CCA)，颈内动脉(interna

6、lcarotidartery，ICA)和颈外动脉(externalcarotidartery，ECA)，分离双侧颈总动脉约1cm，用动脉夹夹闭20min后，解除动脉夹，恢复脑血流，再灌7d，在处死前做Morris水迷宫测试。　　MCAO模型：参照Longa等[1]和罗勇等[2]报道的方法,采用经颈内动脉线栓法制备大鼠右侧MCAO致局灶性永久性脑缺血模型。大鼠用2%的戊巴比妥(0.2mL/100g)麻醉，仰卧位固定，颈正中切口，暴露右侧CCA、ICA和ECA，探查ECA在颈部发出第1分支(甲状颈干)处

7、，在其远心端约0.2cm处结扎并切断ECA，确保ECA残端长度不少于0.5cm;结扎并切断ECA与ICA之间的交通支。用动脉夹暂时阻断CCA及ICA血流，用眼科剪于ECA残端作一纵行小切口，用直径约0.2mm的尼龙线，烧灼头端使其成为直径约为0.25mm的线栓，将线栓从右侧ECA残端插入ICA;轻轻牵拉ECA残端，使其与ICA成一条直线，调整线栓角度，使线栓弧度水平向外，与颈前正中线呈45度水平向外的夹角，移去夹闭ICA的动脉夹，轻轻将线栓送入颅内。从CCA分叉处送入ICA约1.9～2.1cm时通常

8、可遇阻力，大鼠呼吸、心跳突然加快，部分大鼠尿失禁，据此作为大脑中动脉起始处栓塞成功的标志。栓塞成功后，用丝线结扎ECA残端，移去夹闭CCA的蛙心夹，观察无活动性出血后关闭切口。缺血20min后，将栓线抽至颈内动脉起始部恢复脑血流，再灌7d，在处死前做Morris水迷宫测试。　　GI模型：参考Pulsinelli方法，采用改良的四血管夹闭方法制备四血管阻塞全脑缺血模型[3，4]。大鼠用2%的戊巴比妥(0.2mL/100g)麻醉，仰卧位固定，颈正中切口，暴露CCA和与之伴